מערכת מיקרוביוריאקטור שיש נוזלי: פרוטוקול תרבית תלת ממדי לאנקפסולציה של ביציות חזיריות

הכינו מצע של אבקת אתילן פרופילן פלואור, או FEP, בכלי תרבית. הוסיפו טיפה של מדיום התבגרות המכיל קומפלקסים של קומולוס-ביציות, או COCs, על אבקת ה-FEP. מגלגלים בעדינות את הטיפה על האבקה ליצירת גולה נוזלית, או LM. אבקת ה-FEP יוצרת מעטפת נקבובית הידרופובית, המאפשרת חילופי גזים בין הנוזל הפנימי לסביבה הסובבת.

כעת, אספו את יחידת ה-LM והעבירו אותה לבאר המרכזית של צלחת פטרי IVF. הוסף מים סטריליים לטבעת החיצונית כדי לשמור על לחות ה-COCs. לאחר מכן, דגרו את ה-LM בתנאים פיזיולוגיים כדי לאפשר הבשלת ביציות.

לאחר מכן, הסר את המדיום המושקע והוסף מדיום התבגרות טרי. מגע ישיר עם נוזל משבש את מעטפת ה-FEP ההידרופובית ושובר את ה-LM כדי לשחרר את ה-COCs. העבירו את ה-COCs המשוחררים לכלי חדש המכיל טיפה טרייה של מדיום התבגרות ושטפו אותם כדי להסיר חלקיקי FEP.

לאחר הכביסה, העבירו את ה-COCs ואת המדיום הטרי למצע אבקת FEP. מגלגלים את הטיפה כדי לצפות אותה באבקה. לבסוף, העבירו את ה-LM לצלחת פטרי IVF. LMs מצופים אבקת FEP שומרים על המבנה התלת-ממדי של הביציות ומשפרים את הכדאיות שלהם.

הכינו מצע של 5 גרם אבקת FEP בצלחת פטרי בגודל 30 מילימטר. מחלקים טיפה אחת של מדיום התבגרות, המכיל 3 עד 5 COCs על אבקת FEP. סובב את הצלחת בעדינות בתנועה סיבובית כדי להבטיח שהחלקיקים מכסים לחלוטין את פני טיפת הנוזל ויוצרים גולות נוזליות או LMs