אבלציה סלקטיבית בסיוע לייזר של תאי אנדותל בקרנית חזיר: טכניקה לגרימת פגיעה ממוקדת באנדותל הקרנית עבור מחקרי Ex Vivo
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 4:11 דק׳ • July 8th, 2025
השכבה הפנימית ביותר של קרנית החזיר - חלק העין הקדמית השקוף של כלי הדם - מורכבת מתאי אנדותל קרנית, או CECs, הנתמכים על ידי קרום הבסיס - קרום Descemet, או DM. CECs שומרים על שקיפות הקרנית וראייה אופטימלית. כל נזק להם עלול להשפיע על הראייה.
לנזק סלקטיבי של CEC, התחל עם עין חזירית שזה עתה נקטפה במדיום מתאים. הסר את הרקמות שמסביב. טפל בעין בחומר חיטוי מתאים כדי למנוע זיהום מיקרוביאלי על פני השטח. לאחר שטיפת מי מלח, בדוק אופטית את העין הקדמית כדי לשלול חריגות לפני הקרנת לייזר.
אבטח את העין במתקן אחיזה מותאם אישית מול יחידת מנורת חריץ המצוידת בלייזר באורך גל מסוים. דמיין את שכבות הקרנית הבודדות. עם אנרגיית לייזר מתאימה ומיקום נקודת מיקוד, כוון את פולסי הלייזר לשכבת האנדותל של הקרנית. הפולסים הממוקדים קצרי הטווח ובעלי ההספק הגבוה, גורמים לקרע סלקטיבי של CEC מהמשטח החשוף תוך הימנעות מפיזור חום, ובכך מגנים על רקמת ה-DM או הסטרומה.
יצירת פתח כניסה קרוב ללימבוס - הצומת הקרניאוסקלרי, הזרקת תמיסה ויסקו-אלסטית לתוך החדר הקדמי המכיל את הקרנית כדי לייצב אותה ולהגן על שאר ה-CECs. כרתו והעבירו את מקטע הקרנית שטופל בלייזר לתוך צלחת מרובת בארות המכילה מדיה, צד CEC פונה כלפי מעלה. ניתן להשתמש במודל הפגיעה באנדותל הקרנית ex vivo למחקרים נוספים.
לאחר השגת עיני חזיר טריות מבית המטבחיים המקומי, הניחו את הדג
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים