יצירת מודל ארנב של זיהום עצם: טכניקה של גרימת זיהום כרוני על ידי הזרקת חיידקים ישירות למח העצם

כדי ליצור מודל זיהום חיידקי בעצמות, התחל בהנחת ארנב מורדם במצב רוחבי. הסר את הפרווה מהגפה האחורית כדי לאתר את השוקה - העצם המחברת את הברך לקרסול. סמן נקודה הסמוכה למישור הטיביאלי - הקצה הפרוקסימלי של עצם השוקה.

חותכים את העור ואת הפריאוסטאום - שכבת רקמה סביב העצם - וחושפים את השוקה. בעזרת ההפניה המסומנת, צור חלל במח העצם. הכנס פקק שעוות עצם לחלל. לתפור את הפריאוסטאום ואת שכבות העור.

לאחר מכן, קח מזרק המכיל תמיסת סטפילוקוקוס אוראוס. חודרים את המחט דרך פקק שעוות העצם ומחסן את תמיסת החיידקים למח העצם. הוצא את המחט. העבירו את הארנב לכלוב ועקבו אחר התפשטות הזיהום.

פקק שעוות העצם מונע דליפה של תרחיף החיידקים, ומאפשר לחיידקים להתרבות במח העצם. חיידקים אלה מושכים את הלויקוציטים והגורמים הדלקתיים המובילים לאוסטאומיאליטיס - דלקת בעצם הגורמת לירידה באספקת הדם.

מצבים אלה מובילים בסופו של דבר להיווצרות sequestrum - אזור נמק בעצם נטול אספקת דם. חיידקים מסתננים עוד יותר לאזור זה כדי לברוח מהטיפול האנטיביוטי, וכתוצאה מכך זיהום כרוני.

כדי להגדיר את תבנית זיהום העצם, אשר חוסר תגובה לצביטת כפות בארנב לבן ניו זילנדי זכר בן שלושה חודשים במשקל 3 קילוגרם, והשתמש במכונת גילוח חשמלית כדי להסיר את השיער מאזור השוק הפרוקסימלי נגד כיוון צמיחת השיער. יש לחטא את העור החשוף בתמיסת פובידון-יוד, ולהשתמש בעט ובסרגל כדי לסמן את הקצה העליון של השוקה, ואת מיקום חור הקידוח להזרקת S. aureus, תוך הקפדה על כך שמיקום חור הקידוח יהיה באמצע האופקי של רמת השוקה.

לאחר מכן, השתמש באזמל #11 כדי לבצע חתך בעור, ולאחר מכן חתך של 1 סנטימטר בצפק. בעזרת יחידת מקדחת עצם חשמלית, נקב חור בקוטר 2 מילימטר בשוק, ולחץ על החור בקוטר 2 מילימטר ובאורך 2 מילימטר, גליל שעוות עצם. הסר כל שעוות עצם רזרבית לאורך המישור האופקי של רמת השוקה, וודא שהחור מלא בשעוות עצם.

לאחר מכן, השתמש בתפרים כירורגיים נספגים כדי לתפור את הפריאוסטאום והעור, בתפר מזרן אנכי כדי למנוע מהחיה ללעוס את התפרים, והשתמש במזרק אספסיס של 1 מיליליטר כדי להזריק באיטיות 1 x 10⁸ CFU/mL של תמיסת S. aureus לתוך חור הקידוח.