צביעת אאוסין של דגימות רקמות רכות: הליך מבוסס אאוזין להכתמת כליות עכבר שלמות כדי לדמיין מיקרו-מבנים ספציפיים של רקמות

0 צפיות3:14 דק' • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

לצביעה ספציפית לציטופלזמה של תאים במיקרו-סביבות של רקמות רכות, השג כליית עכבר שזה עתה נקטפה. טפל בו בתמיסה מקבעת המכילה פורמלדהיד, חומצה אצטית קרחונית ומתנול. דגירה בטמפרטורות נמוכות.

פורמלדהיד חודר לתאים, ומקשר חלבונים לחלבונים וחלבונים לחומצות גרעין. מתנול מעביר מים מהרקמה וקורש חלבונים. חומצה אצטית גורמת להחמצה תוך תאית ולנפיחות ברקמות, ובכך מנטרלת את התכווצות הרקמות הנגרמת על ידי מתנול.

קיבוע משבית אנזימים ומייצב את מורפולוגיה הרקמה לצביעה שלאחר מכן. הסר עודפי קיבוע באמצעות חיץ. דגרו על הרקמה עם אאוזין Y, צבע חומצי.

אאוזין חודר לתאים קבועים ונכנס לציטופלזמה. הסביבה החומצית של הציטופלזמה, מטיפול בחומצה אצטית, גורמת לפרוטונציה מקסימלית של קבוצות אמינו של חלבונים ציטופלזמיים.

אאוזין, עם קבוצות פונקציונליות טעונות שלילית, מקיים אינטראקציה אלקטרוסטטית עם קבוצות חלבונים פרוטונים, ויוצר קומפלקס חלבון צבע יציב, ומכתים את הציטופלזמה בוורוד עם הצטברותם. לאחר הדגירה, חותכים את הכליה המוכתמת לחתיכות קטנות, ואחריה התייבשות רקמות בהגדלת ריכוזי האתנול.

הטמיעו את רקמת הכליה בשעוות פרפין. השג קטעי רקמה דקים באמצעות מיקרוטום. יתר על כן, יש להרטיב את החלקים לניתוח מיקרוסקופי.

גרעיני תאים לא מוכתמים נראים לבנים על רקע ציטופלזמה מוכתמת בוורוד, מה שמאפשר הדמיה של מיקרו-מבנים בכליות כגון צינורות מפותלים פרוקסימליים, הכוללים תאי אפיתל עם גבולות מברשת, או צינורות איסוף, המרופדים בתאי אפיתל שטוחים ללא גבולות מברשת.

התחל בקיבוע דגימות הרקמות הרכות. מלאו צינור צנטריפוגה של 50 מיליליטר בתמיסה מקבעת המכילה 9.5 מיליליטר של 4% פורמלדהיד ו -0.5 מיליליטר חומצה אצטית קרחונית מוסיפים את דגימת הרקמה הרכה לצינור הצנטריפוגה, ומקררים אותה למשך 24 עד 72 שעות.

לאחר הקירור יש לשטוף את דגימת הרקמות הרכות בתמיסת DPBS למשך שעה. לאחר מכן, יש לצבוע את הדגימה על ידי הנחתה ב-2 מיליליטר של תמיסת צביעת אאוזין Y, ולדגור אותה על צלחת טלטול אופקית למשך 24 שעות.

למחרת, הוציאו בזהירות את דגימת הרקמות הרכות ממיכל הדגימה והסירו עודפי חומר מכתים עם נייר טישו תאית. הנח אותו בכלי חרוטי מעל שלב אדי אתנול לאחסון ושימוש נוסף.

07:41

נוקשה ההטמעה של קבוע, צבעונית, ככלל, דגימות מילימטר-סולם עבור היסטולוגיה ללא סעיף תלת-ממד על-ידי מיקרו-שחושב טומוגרפיה

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:06

שימוש מיקרו רנטגן טומוגרפיה ממוחשבת עם חומצה Phosphotungstic הכנה לדמיין את רקמת האדם האנושי

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:09

לכידת לייזר מיקרודיסקציה של גלימה Subregions עבור אפיון מרחבית ומולקולרית של טרוגניות Intrאטומוראלי, הנחלים, ופלישה

סרטונים קשורים

0 צפיות

02:43

הדמיית פלואורסצנציה של קולוניזציה חיידקית ברקמת כליה בעכברים

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:43

טכניקת צביעת איברים שלמים להדמייה תלת מימדית של הכליה

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:16

תרבות איברים שלמים הר Immunofluorescence מכתים של עכבר Wolffian צינוריות

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:22

בבדיקה היסטולוגית ו echocardiographic של מורפולוגיה לב העכבר

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:37

בידוד, קיבוע, Immunofluorescence הדמיה של העכבר בלוטת יותרת הכליה

סרטונים קשורים

0 צפיות

06:18

ניקוי אופטי ודימות רקמות כליות של אימונוולילד

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:01

3D הדמיה של דוגמאות רקמה רכה באמצעות רנטגן ספציפי שיטה מכתים וטומוגרפיה ממוחשבת Nanoscopic

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 1 אוגוסט 2026