צביעת קרזיל ויולט של קטעי רקמות: הליך צביעה להדמיית סחוס ועצמות בחלקי עוברים קפואים של עכבר

0 צפיות3:32 דק' • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כדי לדמיין אזורי סחוס ועצם בקטע רקמה, התחל עם שקופית זכוכית הנושאת קטע דק של רקמת עובר עכבר קפוא מעניין.

הפשירו לזמן קצר את ההקפאה וטבלו אותה בריכוז אתנול מתאים כדי להסיר את המדיום המוטמע בהקפאה. שלב ההסרה מסייע במניעת התרופפות המדיום, מה שעלול להשפיע על הדמיית הרקמות במהלך הצביעה. בנוסף, אתנול מקבע את הרקמה, שומר על מורפולוגיה ושלמות הרקמות.

לאחר מכן, פיפטה תמיסת סגול קרסיל על הרקמה. סגול קרזיל, צבע בסיסי בעל מטען חיובי, נקשר לחלקים פוליאניונים כגון פרוטאוגליקנים במטריצת רקמת הסחוס. ואילו ברקמה מינרלית כמו עצמות, הוא מגיב עם קבוצות טעונות שלילית כמו קבוצות פוספט במטריצת העצם.

בהיותו צבע מטכרומטי, סגול קרזיל מכתים אזורים שונים של הרקמה בצבעים שונים מהצבע הטבעי בהתבסס על האינטראקציה שלו עם מרכיבים כימיים שונים באזורים אלה.

כעת, שטפו את הרקמה בריכוז אתנול מתאים כדי להסיר עודפי כתם. טבלו את הרקמה בריכוזי אתנול הולכים וגדלים כדי להחליף את המים מהרקמה, ולייבש את הרקמה. שטפו את הרקמה עם קסילן כדי לעקור אתנול, מה שהופך את הרקמה לשקופה למיקרוסקופיה.

תחת מיקרוסקופ אור, רקמת הסחוס נראית מג'נטה ואילו רקמת העצם נראית חומה, מה שמקל על הבידול ביניהם כמו גם מהרקמה שמסביב.

הכן שלושה צינורות צנטריפוגה מסומנים בנפח 50 מיליליטר. הוסף 45 מיליליטר של 80% אתנול לכל צינור. מניחים שלושה צינורות על קרח. הניחו על קרח צינור המכיל 45 מיליליטר אתנול 95% וצינור המכיל 100% אתנול. לאחר מכן, הוסף 45 מיליליטר קסילן לצינור צנטריפוגה של 50 מיליליטר בטמפרטורת החדר.

הפשירו שקופית קרום PEN לזמן קצר על ידי הנחתה על יד עטויה כפפה, ושטפו אותה פעמיים למשך 30 שניות בכל אחד מהצינורות המכילים 80% אתנול בתסיסה, כדי להסיר את תרכובת טמפרטורת החיתוך האופטימלית. לאחר מכן, הניחו את השקופית על יריעת נייר אלומיניום. פיפטה 0.8 מיליליטר של 0.1% סגול קרזיל ב-50% אתנול על השקופית, ומכתים למשך 30 שניות.

שטפו את השקופית בצינור השלישי המכיל 80% אתנול למשך 30 שניות. ייבשו את המגלשה על ידי העברתה דרך הצינור המכיל 95% אתנול למשך 30 שניות, הצינור המכיל 100% אתנול למשך 30 שניות, ולבסוף הצינור המכיל קסילן למשך 30 שניות. לאחר מכן, הניחו את השקופיות על מגב משימה עדין למשך 5 דקות כדי לתת לקסילן להתנקז ולאפשר לחלקים להתייבש.

10:26

נוירונים הדמיה בתוך חלקים במוח עבים שימוש בשיטת גולגי-קוקס

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:29

לייזר מונחה אטלס סטיאוטטי ללכוד את Microdissection של אזורים במוח מושפע פציעה טראומטית

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:09

לכידת לייזר מיקרודיסקציה של גלימה Subregions עבור אפיון מרחבית ומולקולרית של טרוגניות Intrאטומוראלי, הנחלים, ופלישה

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:58

שיטה תיוג vasculature ב עכברים עובריים

סרטונים קשורים

0 צפיות

02:41

קיבוע ומכתים של מקטע רקמות בהקפאה: הליך לעיבוד קטעי רקמת מוח קפואה למיקרודיסקציה בלייזר

סרטונים קשורים

0 צפיות

02:46

Immunostaining של רקמות Craniofacial עכבר

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:31

אוטומטי כימות של תא המטופואטיות - אינטראקציות תא סטרומה בתמונות היסטולוגית של עצם Undecalcified

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:03

הכנה לרקמה וכתמים של רקמות הגולגולת והעצמות הבלתי מתויטות

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:41

מעקב גנטי שבטים באמצעות עכבר קונפטי למחקר רקמות מינרליזציה

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:20

לכידת לייזר מיקרו חיתוך של העכבר סחוס ועצם עבור ניתוח ביטוי גנים

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 1 אוגוסט 2026