צביעת hFTAA של משקעי עמילואיד: טכניקה להמחשת סיבי עמילואיד באמצעות צבע מבוסס אוליגותיופן להדמיית פלואורסצנטיות במקטעי רקמות

תצהיר של אגרגטים חלבונים לא מקופלים - העמילואידים בחלל הרקמה החוץ-תאית הם סימני היכר של מחלות פרוטאופתיות שונות. עמילואידים אלה מורכבים מיריעות בטא המתיישרות בניצב לציר הסיבי, ויוצרות חזרות על יריעות בטא צולבות.

כדי לזהות את משקעי העמילואיד עם חומצה אצטית הפטאמר-פורמיל תיופן, או hFTAA, צבע, קח קטע רקמה קבוע בפורמלין, משובץ בפרפין המכיל משקעי עמילואיד.

טפל בחלקים עם קסילן כדי להפחית את הרקמה לשיפור הנגישות לכתם בשלבים הבאים. הוסיפו כמה טיפות של תמיסת הצביעה hFTAA על חלק הרקמה ודגרו כדי לאפשר לצבע לחדור לרקמה.

ה-hFTAA מכיל שבע יחידות תיופן מצומדות המכילות גופרית וקבוצות קרבוקסיל סופיות המחוברות לעמוד השדרה של התיופין. תכונות אלה מספקות גמישות לצבע הלא כרוך. במהלך הדגירה, קבוצות הקרבוקסיל הסופיות של הצבע נקשרות לשאריות חומצות האמינו הטעונות חיובית המרפדות את החריץ ההידרופובי של יריעת הבטא באמצעות אינטראקציות אלקטרוסטטיות.

כתוצאה מכך, מתרחש שינוי קונפורמציה המפחית את הגמישות המבנית של צבע ה-hFTAA המאוגד. זה משפר את התפוקה הקוונטית הקרינה של הצבע הקשור - היחס היחסי בין פוטונים נספגים לעומת פוטונים הנפלטים. תהליך זה מסייע בשיפור ההדמיה של העמילואידים.

התבונן בשקופית תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי. נוכחותם של כתמי פלואורסצנציה צהובים-אדומים מעידה על נוכחות של עמילואידים בקטעי רקמות.

הכן את תמי