מסון גולדנר צביעת טריכרום: טכניקה להמחשת קולגן באזורי לב לזיהוי פיברוזיס קרדיווסקולרי

פיברובלסטים לבביים המופעלים על ידי מתח מפקידים עודף קולגן באזורים פגועים, מצב הנקרא פיברוזיס, הפוגע בתפקוד הלב.

כדי לדמיין את היקף הפיברוזיס, ראשית, חתך חסימות לב משובצות פרפין. הנח את החלקים בשקופית. מחממים את השקופית כדי להמיס את הפרפין, ומאפשרים לחלקים להידבק.

טבלו את השקופית בקסילול כדי להפחית את הרקמה. טפל בחלקים בעוצמות אלכוהול יורדות, כדי להחזיר לחות לחלקים ולסייע בכריכה שלאחר מכן של רכיבי כתמים מימיים.

דגרו את החלקים בקיבוע חומצי המקשר בין חלבונים, ומייצב את מבנה הרקמה. יש לשטוף במים כדי להסיר שאריות קיבוע.

טבלו את השקופית בתמיסת המטוקסילין. הצבע הקטיוני קושר את ה-DNA הטעון שלילית, ומכתים את הגרעין בכחול. יש לשטוף במים להסרת כתמים עודפים.

דגרו את השקופית בחומצה פוקסין-פונסו, צבע אניוני בעל מולקולה קטנה המקיים אינטראקציה עם חלבונים ציטופלזמיים טעונים חיובית וקולגן, וצובע אותם באדום. טפל בחומצה אצטית מדוללת, להסרת עודפי כתם.

טבלו את השקופית בתמיסת חומצה פוספומוליבדית-כתומה G. כתום G, צבע בעל מולקולה קטנה, מכתים אריתרוציטים בכתום-אדום. חומצה פוספומוליבדית, חומצה בעלת מולקולות גדולות, מסלקת צבעים של מולקולות קטנות מהקולגן, והופכת אותו לחסר צבע.

דגרו את החלקים בצבע ירוק בהיר, שהמולקולות שלו קושרות סיבי קולגן וצובעים אותם בירוק. תחת מיקרוסקופ, האזורים הפיברוטיים נראים ירוקים המעי