אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 3:03 דק׳ • July 8th, 2025
בחלודת קפה, נבגים של Hemileia vastatrix - פטרייה פתוגנית - נוחתים על פני הצמח ומגדלים צינור נביטה, ובכך יוזמים זיהום דרך הקורים.
קורים אלה מתפשטים בתוך הרקמה ופולשים לתאי הצמח דרך מבנים מיוחדים דמויי אצבעות הנקראים האוסטוריה, הסופגים את חומרי המזון של הצמח. האוסטוריה גם מפרישה מולקולות אפקטור המזוהות על ידי חלבוני העמידות של הצמח, מה שמוביל למעטפת עשירה בפקטין של האוסטוריה כדי להגביל את הזיהום.
כדי לדמיין את האינטראקציה הזו, התחל עם קטע עלי קפה אולטרה-דק, משובץ שרף, נגוע. כעת, טפל בדגימה בכחול כותנה לקטופנול - כתם היסטולוגי המורכב מפנול, חומצה לקטית, גליצרול וכחול כותנה. מחממים את השקופית לזמן קצר.
כאשר רכיבי הצבע חודרים לרקמה, הפנול מסלק אורגניזמים חיים, בעוד שחומצה לקטית וגליצרול עוזרים לשמר את הארכיטקטורה התאית. במקביל, מולקולות הכותנה הכחולות נקשרות לחלקיקי הכיטין בדופן התא הפטרייתי ומכתימות אותו בכחול.
שוטפים את הדגימה במים מזוקקים. לאחר מכן, טפל בדגימה בצבע אדום רותניום.
מולקולות הרותניום הטעונות חיובית נקשרות לפוליסכרידים הטעונים שלילית בדופן התא הצמחי העשיר בפקטין ומכתימות אותו באדום. שוב, שטפו את השקופית ודמיינו תחת מיקרוסקופ.
דופן התא הצמחי העשירה בפקטין נראית אדומה, ומכילה את האוסטוריה הכחולה המשתרעת מקורי הפטרייה הכחולים.
חותכים את הבלוק לחלקים בעובי 5 מיקרומטר באמצעות
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים