אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 2:30 דק׳ • July 8th, 2025
בצמחים, ליגנין - ביופולימר מורכב - מופקד בדרך כלל בדפנות התא של הרקמות כדי לספק תמיכה.
ליגניזציה נמצאת בעיקר בעיבוי דופן התא המשני של תאי קסילם מוליכי מים, כגון כלי דם וסיבים, ובתאים החוץ-קסילריים, כגון סיבים בין-פאסיקולריים.
מבחינה מבנית, ליגנין מורכב ממבשרי מונוליגנול צולבים. אלכוהולים ארומטיים אלה מתפלמרים ויוצרים מבנה מסועף מאוד. תכונה זו משפרת את חוזק הצמח וקשיחותו.
כדי לדמיין שקיעת ליגנין באמצעות צביעת ויזנר, קח חתכי גבעול דיקוט משובצים באגרוז שמקורם בחלקו האמצעי או התחתון של הצמח. הוסף אותם לצינור מיקרו-צנטריפוגה המכיל מאגר מתאים.
הוסף את תמיסת הכתמים המוכנה, המכילה את הפלורוגלוצינול והאתנול המחומצים, לקטעי הגבעול. האלכוהולים הקיימים בליגנין מגיבים עם הפלורוגלוצינול והאתנול כדי לייצר פיגמנט ורוד. התוצאה היא התפתחות של צבע ורוד המתאים לתצהיר הליגנין בדפנות התא של תאים מיוחדים.
כעת, העבירו את החלק המוכתם לשקופית מיקרוסקופית. הנח בעדינות כיסוי מעל הקטע, הימנע מבועות, כדי לעזור לדמיין אותו טוב יותר. דמיין את החלקים תחת מיקרוסקופ אור.
הצבע הוורוד בתאי הקסילם המיוחדים ובסיבים הבין-פאסיקולריים בחתכי הגזע מאשרים את נוכחותו של ליגנין ברקמות אלה.
לצורך צביעת פלורוגלוצינול, העבירו את חלקי הגבעול לצינור מיקרו-צנטריפוגה. הוסף 1 מיליליטר מתמיסת הפלורוגלוצינול לצינור, וכסה אותו מיד מכיוון
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים