אי הכללת גודל הפרדה מבוססת כרומטוגרפיה של שלפוחיות חוץ-תאיות חיידקיות: טכניקה להפרדת אוכלוסייה הטרוגנית של בועיות קרום חיצוני של חיידקים גראם-שליליים בהתבסס על גודלן

בתנאי תרבית מתאימים, חיידקים גראם-שליליים משחררים שלפוחיות ממברנה חיצוניות נושאות מטען, או OMVs, לתוך הסופרנטנט. שלפוחיות אלה הן מבנים כדוריים קטנים בגודל הטרוגני, המתווכים תקשורת סלולרית.

כדי לפצל תת-אוכלוסיות בגודל שונה של OMVs, קח עמודת כרומטוגרפיה ריקה עם מסנן מתאים בבסיסה כדי לתמוך במטריצה.

ארוז את העמודה במטריצת סינון ג'ל המורכבת מחרוזים כדוריים אינרטיים כימית בגודל נקבוביות מוגדר, מה שמבטיח שהגודל אופטימלי כדי למנוע כניסת OMV בגודל גדול. אזנו את העמודה עם מאגר מתאים כדי למנוע מהחרוזים להתייבש לטיהור מיטבי.

טען את תרבית החיידקים המכילה תת-אוכלוסיות בגודל שונה של OMVs, אגרגטים של חלבונים וחומצות גרעין בחלק העליון של העמודה. אפשר לדגימות לרוץ בכוח הכבידה.

כאשר הדגימות עוברות דרך העמודה, OMVs גדולים יותר שאינם יכולים להיכנס לנקבוביות, עוברים דרך הרווחים הבין-חלקיקיים בין חרוזי הג'ל כדי להיפלט תחילה. בינתיים, ה-OMV הקטנים יותר חודרים לנקבוביות המטריצה, לוקחים נתיב ארוך יותר ונעלמים מאוחר יותר.

בשל גודלם הקטן יותר, מצטבר החלבון וחומצות הגרעין נכנסים לנקבוביות שונות במטריצה, מה שגורם להם להיות בעלי זמן השמירה הארוך ביותר בעמודה ולהיפטר מהשברים האחרונים. אסוף פליטות OMV נפרדות ואחסן אותן לניתוח נוסף.

כדי להתחיל, השתמש במוט זכוכית כדי לערבב בקבוק מלאי של מדיום סינון ג'ל, ושפך את הנפח