אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 3:59 דק׳ • July 8th, 2025
כרומטוגרפיה של שכבה דקה בעלת ביצועים גבוהים, HPTLC, היא טכניקה אנליטית מתקדמת להפרדת אנליטים שונים באמצעות חלקיקים סופחים בגודל עדין כשלב הנייח. תכונה זו מאפשרת אריזה יעילה, ומבטיחה הפרדה טובה יותר.
כדי להפריד שומנים באמצעות HPTLC, קח תערובת של ליפידים עם קוטביות שונות המתקבלות מנויטרופילים. כעת, יש לאזן מראש את הצלחת בממס אורגני להסרת עקבות של אדי מים ולכלוך, ולאחר מכן להפעיל בטמפרטורה גבוהה כדי למנוע הידרדרות הצלחת.
מרחו את תערובת השומנים וסטנדרט כנקודות נפרדות ליד בסיס הצלחת. העבירו את הצלחת לתא זכוכית רווי בממס קוטבי - השלב הנייד. אפשר לממס לנוע כלפי מעלה באמצעות פעולה נימית.
תוך כדי תנועה, יותר שומנים קוטביים נודדים לאורך חזית הממס בשל זיקתם לממס הקוטבי. לעומת זאת, פחות שומנים קוטביים נספגים על חלקיקי הסיליקה ופיגור. הפעל את השומנים בממס קוטביות ביניים, ואחריו ממס לא קוטבי לחלוטין, וכתוצאה מכך הפרדת שומנים נוספת.
כאשר חזית הממס מגיעה למרחק הרצוי, הסר את הצלחת וייבש אותה. חשוף את הצלחת למגיב מכתים, כגון גופרת נחושת מחומצת, הגורמת לחריכת שומנים. זה עוזר לדמיין כתמי שומנים מופרדים, בהשוואה לכתמים הסטנדרטיים המסייעים בזיהוי ראשוני של שומנים.
כדי להתחיל, מלאו עד 5 מיליליטר מכל תמיסה בתא הזכוכית המתאים. הוסף כל סוג של נייר סינון כדי להגביר את מהירות הריצה בכל תא. דגירה מוקדמת של צלח
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים