אלקטרופורזה של ג'ל פוליאקרילאמיד: טכניקה אנליטית לזיהוי הפראן סולפטים באורכי שרשרת משתנים שבודדו מרקמת הריאה של עכבר

גליקוזאמינוגליקנים סולפטיים כמו הפראן סולפטים, HSs, הם פוליסכרידים טעונים שלילית, ליניאריים, סולפטיים באורכי שרשרת משתנים, המחוברים לחלבוני פני התא.

כדי להעריך HSs באורך שונה שבודדו מרקמת ריאות עכבר, התחל בהרכבת קלטת ג'ל. מלאו אותו חלקית בתמיסת אקרילאמיד-ביסקרילאמיד מרוכזת מאוד, כולל חומרים מזרזים - אמוניום פרסולפט וטטרה-מתיל-אתילן-דיאמין. כיסוי במים למניעת מגע אוויר, מה שעלול לעכב פילמור. דגירה.

חומרים מזרזים גורמים לפילמור אקרילאמיד-ביסקרילאמיד, ויוצרים ג'ל לפירוק נקבוביות קטנות. השליכו מים. הוסף ריכוז נמוך של תמיסת אקרילאמיד-ביסקרילאמיד עם חומרים מזרזים. הכנס מסרק ג'ל ליצירת בארות. התמיסה מתפלמרת ויוצרת ג'ל ערימה בעל נקבוביות גדולות.

טען את תאי מיכל האלקטרופורזה במאגר פועל למוליכות חשמלית אופטימלית במהלך אלקטרופורזה.

ממיסים את תערובת ה-HS במאגר טעינה המכיל צבע מעקב וסוכרוז. לאחר מכן, העבירו את התערובת הזו וסולמות HS סטנדרטיים לבארות קלטות. סוכרוז מגביל את התערובת לבארות. צבע עוזר לעקוב אחר התקדמות האלקטרופורזה.

התחל אלקטרופורזה במתח נמוך. HSs טעונים שלילית חוצים את ג'ל הערימה, נעים לעבר האנודה הטעונה חיובית, ומתרכזים בממשק הג'ל הערום-פותר עקב הבדל בגודל הנקבוביות.

הגדל את המתח. HSs בעלי שרשרת קטנה נודדים במהירות דרך הג'ל המפתר, חוצים רחוק יותר, בעוד HSs ארוכי שרשרת נלכדים בתוך מ