אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 4:21 דק׳ • July 8th, 2025
אלקטרופורזה מיקרופלואידית היא טכניקה להפרדת שברי DNA בגדלים שונים בתוך מיקרו-נימים.
כדי להתחיל, קח שבב מיקרופלואידי מרובה בארות עם בארות ייעודיות לתערובת של פולימר מבוסס ג'ל וצבע פלואורסצנטי, דגימות DNA וסולם DNA ידוע במשקל מולקולרי. בארות אלה מחוברות זו לזו באמצעות רשת של מיקרו-ערוצים.
יש להוציא תערובת צבע ג'ל לבארות שהוקצו. הרכיבו את השבב על תחנת תחול המצוידת מראש במזרק ריק. לחץ כלפי מטה על בוכנת המזרק, הפעל לחץ כדי לאלץ את תערובת צבע הג'ל לתוך מיקרו-תעלת ההפרדה.
הסר את השבב והכניס רכיבים אחרים לבארות שלהם. הוסף סמן - תקן פנימי המכייל את גודל הדגימה - לבארות המכילות את הסולם והדגימות.
הכנס את השבב למנתח שברים כדי להפעיל את השבב. ברגע שנכנס פנימה, המתח המופעל מייצר כוחות אלקטרופורטיים, ומניע את הדגימה מהבאר למיקרו-ערוץ טעינת הדגימה משם היא מגיעה לצומת בין תעלה זו לתעלת ההפרדה. הזרם החשמלי עוזר לדגימה להיכנס למיקרו-ערוץ ההפרדה.
מולקולות הצבע הפלואורסצנטיות משלבות מקטעי DNA טעונים שלילית הנעים לעבר האנודה במהירויות אלקטרופורטיות שונות ביחס לגודלם המולקולרי - שברים קטנים יותר נודדים מהר יותר מגדולים יותר. כתוצאה מכך, השברים נפרדים לרצועות בגדלים שונים שזוהרות.
גלאי מבוסס לייזר מודד את הקרינה של כל פס ומתעד אותה כאלקטרופרוגרמה המציגה DNA בגדלים שונים כשיא מובהק.
לפני שמתחילים, הביאו א
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים