היישום של קשירת העורקים התיכון הקבע מוחין העכבר

המטרה הכוללת של הליך זה היא לחקור איסכמיה מוחית מוקדית במודלים של בעלי חיים. זה מושג על ידי ביצוע חתך קטן בעור בין עין שמאל לבסיס האוזן. לאחר מכן, מבוצעת קרניוטומיה בצומת הקשת הזיגומטית ועצם הקשקש כדי לחשוף את עורק המוח האמצעי, לאחר מכן קושרים את עורק המוח האמצעי באמצעות צריבה של כלי דם קטן.

לבסוף, העור נתפר כדי לסגור את הפצע. בסופו של דבר, ניתן להשיג תוצאות המראות אוטם הממוקם בהמיספרה השמאלית של מוח העכבר. ניתן לצבוע את המוח ב-TTC או לסרוק אותו באמצעות MRI לצורך הדמיה של שבץ מוחי.

מוח השבץ יכול לשמש גם לקביעת ביטוי חלבון או mRNA. היי, אני גרזה צ'ולה. אני סטודנטית לתואר שני במעבדה של גייל ג'ונסון באוניברסיטת רוצ'סטר.

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום השבץ, כגון המחשת המנגנונים המובילים לתא זה במוח איסכמי. כדי להתכונן לניתוח, יש לעקר את כל המכשירים הכירורגיים, ספוגי הגזה והאפליקטורים הקוגניטיביים על ידי חיטוי. שמור על כלי ניתוח באתנול 70% במהלך הניתוח וייבש באוויר על גזה סטרילית ממש לפני השימוש.

יש לרסס את אזור העבודה באתנול 70% שעתיים לפני הניתוח. הזריק לעכבר 0.05 מיליגרם לק"ג בופרנורפין. התרופה תינתן שוב מיד לאחר הניתוח, ולאחר מכן כל שלוש עד חמש שעות במהלך 24 השעות הראשונות לאחר הניתוח.

השתמש במכשיר אידוי הרדמה כדי להרדים את העכבר עם תערובת גז פלואור ISO של 3%, 20% חמצן. התאם את כמות החמצן בעזרת מד זרימה. בדוק את רמת ההרדמה על ידי צביטה בבוהן או בזנב.

שמור על רמת ההרדמה עם 2% ISO פלואור. מרחו דמעות מלאכותיות על עיני העכבר והיזהרו כדי להימנע מפגיעה בעין. במהלך ההליך הכירורגי.

הנח את העכבר על צדו הימני במצב רוחבי באמצעות קוצץ החיות. לגלח את האזור בצד שמאל בין עין שמאל לבסיס האוזן השמאלית. נקו את האזור על ידי החלפה בין תמיסת בטדין לאתנול 70% eth באמצעות אפליקטורים עם קצה כותנה ושפשוף קל של האזור.

יש צורך בחזרה. הנח את העכבר על כרית חימום המחוברת לבדיקה רקטלית כדי לשמור על טמפרטורת הגוף על 37 מעלות צלזיוס, הכנס את הגשושית הרקטלית באמצעות שמן מינרלי. מקם את העכבר על צדו הימני מתחת למיקרוסקופ ואבטח בעזרת סרט.

חותכים חלון בספוג גזה ומכסים את אזור הניתוח במספריים ישרים עדינים. בצע חתך אנכי בין עין שמאל לבסיס האוזן השמאלית. השתמש בהמוסטטים מעוקלים כדי לשמור על אזור הניתוח פתוח אם מתרחש ייבוש יתר של הרקמה במהלך הניתוח.

השתמש באפליקטורים עם קצה כותנה כדי למרוח PBS סטרילי. השתמש במספריים קפיציים כדי לבצע חתך אופקי בשריר הטמפורלי ומשוך לאט בעזרת מלקחיים כדי להפריד מעט את השריר הטמפורלי מהגולגולת. החזק את עצם הלסת עם מלקחיים מעוקלים והשתמש במחט בגודל 18 כדי לבצע קרניוטומיה תת-זמנית קטנה בצומת הקשת הזיגומטית ועצם הסוליה של סקוואם.

המושבעים מסירים חתיכות קטנות מהגולגולת כדי לחשוף את ה-MCA. אין לפגוע בקשת הזיגומטית ובתוכן המסלול במהלך תהליך זה. בעזרת צריבה קטנה של כלי דם קשרו את החלק הדיסטלי של ה-MCA, החזירו את השריר הטמפורלי למקומו המקורי והשתמשו בחמישה תפרי ניילון אפס.

כדי לסגור את מקום החתך, הפסק את ההרדמה והסר את הגשושית הרקטלית. הזריק לעכבר מנה שנייה של בופרנורפין תת עורית. החזירו את העכבר לכלוב, שנשמר בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס.

עם לוח חימום. עקוב מקרוב אחר העכבר במשך 24 השעות הבאות לאיתור אי נוחות, כולל ירידה בתיאבון או בצריכת מים, יציבה כפופה, נשימה מוגברת או שיער זקוף. ספק לעכבר ג'ל התאוששות מיד לאחר הניתוח.

יש להמתין שעתיים-שלוש לאחר הניתוח. לאחר מכן e הזריק לעכבר בופרנורפין תת עורי כל שלוש עד חמש שעות עד 24 שעות. 24 שעות לאחר הניתוח, יש להרדים את העכבר עמוק ולהחדיר לעכבר 4% TTC.

הסר את המוח והניח אותו בתמיסת אלדהיד 4% פרפורם למשך הלילה. למחרת, מקמו את המוח בבלוק החיתוך. השתמשו בסכיני גילוח כדי לפרוס את המוח לפרוסות בעובי של מילימטר אחד.

הניחו את הפרוסות ליד סרגל בקנה מידה של מילימטר. שימוש במצלמה דיגיטלית המחוברת למיקרוסקופ מנתח. צלמו את הפרוסות בתוכנת התמונה J.

לחץ על תפריט הקובץ ופתח את התמונה הרצויה. לחץ על לשונית הקו הישר בתוכנית. צייר קו ישר בין שני השוליים בסרגל.

לחץ על תפריט ניתוח ובחר הגדר קנה מידה. הגדר את המרחק הידוע כאחד ואת יחידת האורך כמילימטר. לחץ על כרטיסיית העיגול ביד חופשית.

צייר עיגול כדי לתאר את חצי הכדור הנגדי. לחץ על תפריט ניתוח ובחר מדידה. חלון החישוב יופיע ויציג את שטח העיגול המצויר.

צייר עיגול נוסף סביב חצי הכדור המקביל, למעט אזור הקו הלבן. מדוד את השטח כפי שהוצג קודם לכן. הערך החדש יתווסף לחלון החישוב.

ההפרש בין הערך הראשון לשני מייצג את שטח ה-infarct. חשב את שטח הקו בכל פרוסה על-ידי חזרה על השלבים שלעיל לעובי פרוסה של מילימטר אחד. חשב את נפח הקו על-ידי סיכום שטח הקו המחושב בכל פרוסה.

איור זה מראה את המוח של כתמי TTC 24 שעות לאחר קשירת MCA קבועה בעכבר פראי מסוג C 57 BL 6. אתר השבץ לבן במראהו וניתן לראותו מהגדלה וזוויות שונות. מוצגות כאן פרוסות בעובי מילימטר אחד של מוח השבץ המוכתם ב-TTC מהאוטום הקדמי לאחורי.

הנפח חושב 24 שעות לאחר הניתוח. נפח האוטם הוא כ -23 מילימטרים מעוקבים פעם חרדל. ניתן לבצע טכניקה זו תוך 30 דקות אם היא מבוצעת כראוי.

תודה שצפית.