Multianalyte Immunobead Assay: טכניקת Immunoassay מבוססת זרימה לזיהוי בו-זמני של תת-סוגים מרובים של נוגדנים בדגימת סרום אנושי
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 4:45 דק׳ • July 8th, 2025
בדיקת חרוזים אימונו-אנליטיים משתמשת במספר מיקרוספירות מצופות אנטיגן כדי לזהות את נוגדני המטרה המתאימים להם בו זמנית.
כדי להתחיל בבדיקה זו, קח תערובת של מיקרו-חרוזים בצינור המכיל את המאגר המתאים. כל חרוז מצופה באנטיגן ספציפי על פני השטח שלו, מה שמאפשר הבחנה קלה של חרוזים זה מזה.
פיפטה את תערובת החרוזים החיסוניים המצופים לבארות של צלחת בדיקת מיקרוטיטר. השלם את הבארות עם דגימת הסרום המכילה איזוטיפים שונים של נוגדני מטרה. לגרסאות אלה יש הבדלים עדינים במבנה שלהן, מה שמאפשר לכל באר להכיל מספר נוגדנים ראשוניים.
דגירה, כדי לאפשר לאיזוטיפים של נוגדנים לדוגמה להיצמד לאנטיגנים ספציפיים שנלכדו על חרוזי אימונוס בהתאמה. יש לשטוף עם מאגר בדיקה כדי להסיר נוגדנים ראשוניים לא קשורים. הוסף לבאר נוגדנים משניים מתויגים בצבע פלואורסצנטי, המתאימים לכל גרסה של נוגדן ראשוני.
כל נוגדן משני המסומן נקשר לאתר ה-Fc של הנוגדן הראשוני המתאים. קומפלקסים מרובים של נוגדנים ראשוניים של אנטיגן שנלכדו על ידי חרוזים מסומנים באופן פלואורסצנטי. שטפו את הצלחת כדי להסיר נוגדנים משניים לא קשורים.
קרא את הלוח באמצעות מנתח פלואורסצנטי המסוגל לזהות בו זמנית פלואורופורים שונים באורכי הגל שלהם. בהתאם לזיהוי האות, ניתן להעריך איזוטיפים שונים של נוגדנים בסרום וקשירתם לאנטיגנים שונים.
לביצועי בדיקה, השעו מחדש את המיקרוספירות המצומדו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים