בדיקה דו-שכבתית ליפידית נתמכת כדורית: טכניקה לצפייה במכלול ספטין על מיקרוספרות

ספטינים הם חלבוני שלד מרכזיים הנקשרים למשטחי קרום פלזמה מעוקלים.

כדי לצפות בהרכבת ספטין במבחנה על מיקרוספרות, ראשית, קח השעיה של חרוזי סיליקה מיקרוסקופיים בגודל אחיד, הפועלים כתמיכה מוצקה להיווצרות דו-שכבתית. מערבולת את המתלה הזה כדי לשבור כל אשכולות חרוזים.

השלימו אותו עם שלפוחיות חד-כיווניות קטנות, רכבי שטח - שלפוחיות כדוריות המוקפות בשכבת שומן דו-שכבתית אחת. דגירה עם תסיסה מתמדת, ומונעת שקיעה של מיקרוספירות.

במהלך הדגירה, קבוצות הראש הקוטביות החיצוניות מקלות על ספיחה של רכבי שטח על פני המיקרוספרה ההידרופילית. אינטראקציה זו גורמת לרכבי שטח להיקרע, ואחריו היתוך של שומנים של SUV על פני המיקרוספרה המעוקלת כשכבה רציפה, וכתוצאה מכך נוצרת שכבת שומנים כדורית ונתמכת, SLB.

יש לשטוף כדי להסיר עודפי שומנים לא קשורים ולהשהות מחדש במאגר תגובה. העבירו את תרחיף ה-SLB הכדורי לאזור קטן של משטח מצופה פוליאתילן גליקול, כדי למנוע ספיחות לא ספציפיות. הוסף לתא תרחיף ספטין עם תווית פלואורסצנטית ודגירה.

ספטינים יוצרים הטרו-אוליגומרים המזהים את העקמומיות החיובית של SLBs כדוריים, ומתפלמרים ליצירת חוטים. בסופו של דבר, חוטי מחיצה מתקשרים זה עם זה, מה שמוביל להיווצרות מבנים מסדר גבוה יותר.

התבונן ב-SLBs מצופים ספטין תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי ברזולוציה גבוהה. נוכחות הקרינה מעידה על שקיעה רגישה לעקמומיות של ספ