בדיקת פעילות אנדוטוקסין: בדיקה ביולוגית מבוססת כימילומינסנציה לחקר פעילות אנדוטוקסין בדגימת דם

בחיידקים גרם שליליים, אנדוטוקסינים ליפופוליסכרידים הם מרכיבים חיוניים של הממברנה החיצונית של החיידקים.

מבחינה מבנית, אנדוטוקסין מורכב מאנטיגן O - שרשרת פוליסכריד חיצונית המחוברת דרך ליבה מרכזית לליפיד A, גליקוליפיד חיסוני חיוני לפעילות אנדוטוקסין.

כדי לחקור את פעילות האנדוטוקסין, קח מבחנה עם מאגר מתאים המכיל נוגדנים נגד שומנים A, זימוזן - מפעיל נויטרופילים אקסוגני, ולומינול - חומר כימילומינסנטי.

השעו נפח אופטימלי של דגימת דם נגועה הכוללת אנדוטוקסינים ותאי דם, כולל נויטרופילים. לדגור את הצינור בתנאים פיזיולוגיים.

במהלך הדגירה, נוגדן אנטי-ליפיד A מזהה את מרכיב השומן-A של האנדוטוקסין ונקשר אליו באמצעות תחומי קשירת אנטיגן, וכתוצאה מכך נוצר קומפלקס נוגדנים-אנדוטוקסין.

תחום ה-FC של הנוגדן הקשור לאנדוטוקסין נקשר לקולטן המשלים של הנויטרופילים, ומציג את האנדוטוקסינים המחוברים לנויטרופילים. קשירה זו פועלת כגירוי ראשוני לנויטרופילים, ומפעילה את הפעלתם.

נויטרופילים מופעלים בולעים את הזימוזאן ויוזמים תגובה חיסונית, וכתוצאה מכך שחרור מהיר של מיני חמצן תגובתיים, ROS, מהנויטרופילים. ROS אלה מקלים על חמצון לומינול, וכתוצאה מכך פליטת אור על ידי כימילומינסנציה.

עוצמת האות הכימילומינסנציה תואמת את פעילות האנדוטוקסין בדגימת הדם.

ראשית, הנח את צינורות ה-EA לשימוש במדפי צינורות והסר את המכסים. השתמש ב-co