אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 5:00 דק׳ • July 8th, 2025
נוירוטרנסמיטורים מונואמינים, שליחים כימיים אנדוגניים, מעבירים אותות על פני הסינפסה, נקודת המגע בין נוירונים. מערכת נוירוטרנסמיטורים מונואמין מווסתת היטב חיונית לתפקוד תקין של תאי עצב.
כדי לסנן את ההשפעה של תרופת בדיקה על שחרור מונואמין ex vivo, השג פרוסות רקמת מוח של חולדות המכילות את אזור העניין במאגר מחומצן מקורר, תוך שמירה על כדאיות הרקמות.
העבירו את פרוסות הרקמה לבארות של צלחת מרובת בארות, עם תוספות פילטר נקבוביות המחוברות לאספקת תערובת גזית וכוללות נוזל מוחי מלאכותי מחומצן, aCSF, בתוספת מעכבי מונואמין אוקסידאז. דגירה.
המעכבים מתפזרים לתאים ומנטרלים אנזימי מונואמין אוקסידאז, מונעים פירוק של מונואמינים ומגדילים את ריכוזם הזמין לאחסון ושחרור.
העבירו את התוספות המכילות רקמות לבארות המכילות aCSF מחומצן, ואת תרופת הבדיקה. דגירה. התרופה עשויה לעורר את מערכת המוליכים העצביים של מונואמין, להגדיל את ריכוז המונואמין בחלל החוץ-עצבי, מה שמוביל לשחרורם מרקמת המוח לתמיסה.
המונואמינים המשוחררים עוברים דרך התוספות הנקבוביות לבארות, ונפרדים מהרקמה.
לאחר הדגירה, הסר את התוספות המכילות פרוסת רקמה. אסוף את תמיסת המונואמין בצינור המורכב מממס התואם לכרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים, HPLC. העבירו את תכולת הצינור ליחידות סינון שהורכבו מראש. צנטריפוגה, הסרת מזהמים עיקריים.
טען את המסנן שהתקבל לעמ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים