לבחון התנהגות כימו-הימנעותית בתולעים טרנסגניות באמצעות בדיקת הימנעות אוסמוטית

בנמטודות, הנוירונים הכימו-סנסוריים - ASH - יכולים לחוש שינויים אוסמולריים בסביבתם הנגרמים על ידי דוחים כימיים. בתגובה, תולעים אלה מתרחקות מדוחי החומרים ומובילות להתנהגות של הימנעות כימותרפית.

צבירת חלבונים חריגה בתוך נוירוני ה-ASH עלולה להוביל לשינויים בהתנהגות כימותרפיה.

כדי לבחון את התנהגות ההימנעות האוסמוטית בתולעים, התחל עם זחלי נמטודות טרנסגניות עם אגרגטים חלבוניים בנוירוני ASH. טפל בנמטודות בתרכובות ביו-אקטיביות המפחיתות את צבירת החלבונים ומחזירות התנהגות הימנעות אצל תולעים מסוימות.

העבירו תולעים מטופלות לצלחת מדיה מוכנה מראש ונטולת מזון כדי לשמור עליהן בשלב הזחל. בצלחת יש גליצרול - כימיקל בעל חוזק אוסמוטי גבוה - הנמצא במרכזה, ויוצר מחסום אוסמוטי המחלק את הצלחת לשני אזורים, אזור רגיל ואזור מלכודת.

השלימו את אזור המלכודת בהרדמה כדי לעצור את תנועת התולעים החוצות את המחסום. הוסף טיפה של בוטנדיון לאזור המלכודת כדי למשוך את כל התולעים, ולגרום להן לנוע אליו.

התולעים עם צבירת חלבונים אינן יכולות לחוש את הלחץ האוסמוטי, לחצות את קו המחסום ולהיות מורדמות באזור המלכודת. התולעים עם התנהגות כימותרפית משוחזרת מתרחקות מהגליצרול ונשארות באזור הנורמלי.

מספר התולעים באזור הנורמלי נמצא בקורלציה עם היעילות של תרכובות ביו-אקטיביות בשיקום התנהגות ההימנעות הכימותרפית.

לבדיקת ההימנעות האוסמוטית, חלק