אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 5:00 דק׳ • July 8th, 2025
בתגובה לפצע, תאים מפרישים מייצרים מולקולות איתות פרקריניות להפעלת מיובלסטים - תאי שריר לא ממויינים. מיובלסטים מופעלים נודדים לעבר אתר הפצע, שם הם מתרבים, וגורמים לפצע להחלים.
כדי להעריך את יכולת הנדידה של מיובלסטים במבחנה, קח צלחת מרובת בארות המכילה שכבה חד-שכבתית של מיובלסטים עכבריים. בעזרת קצה פיפטה, מגרדים את השכבה החד-שכבתית כדי ליצור טלאי ליניארי ונטול תאים בתוך הבאר, המדמה את אתר הפצע.
משלימים בזהירות את הבאר עם מדיום הגידול מבלי להפריע לתיקון הפצע.
קח תוספת קרומית המכילה תרבית דבוקה של תאי פסגה עצבית, או NCCs - תאי הפרשה - בתווך מתאים. הנח את התוספת בתוך הבאר, כך שה-NCCs בבסיס יהיו ליד מדבקת הפצע. דגירה של התרבות המשותפת למשך הזמן הרצוי.
במהלך הדגירה, ה-NCCs משחררים מולקולות איתות שנקשרות לקולטנים הספציפיים על המיובלסטים, ויוזמות מפל איתות. איתות זה מקל על ארגון מחדש של אקטין במיובלסטים, וכתוצאה מכך, תאים אלה מפתחים הקרנות ציטופלזמיות כגון lamellipodia ו-filopodia, בקצוות שלהם. הקרנות אלה מסייעות למיובלסטים לנדוד לעבר האזור הפצוע ולאכלס מחדש בהדרגה, מה שמוביל לריפוי פצעים.
הניחו את הצלחת מתחת למיקרוסקופ, והתבוננו בריפוי הפצע, שהיקפו מתואם עם יכולת הנדידה של מיובלסטים בתרבית משותפת.
כאשר התאים מגיעים למפגש של 70% עד 80%, הוציאו את המדיום העל-טבעי מתא ה-C2C12 היטב, ושטפו את הת
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים