Name: אפיון מנגנוני ההתנגדות אוכלי עשב: Spittlebugs על Brachiaria Spp. כדוגמה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 52 s
Description: למדו את שיטת מבחן הבחירה-הכפויה לאפיון מנגנוני ההתנגדות של צמחים לנזקי אכילה ב-Brachiaria. פרוטוקול זה מסייע לחקור את תרומת האנטיביוזיס והסובלנות לניהול מזיקי הדובון.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

זה ייצור עבודה ניסויית המוצג לעיל משקף את לעזור מסור ונלהב של רינאלדו Pareja נתמך על ידי חביב לינה אגירה, ג&#39;ילברטו קורדובה, ויליאם Mera, Ximena Bonilla ו דריו Viveros. אנו מודים גם מיילס ג&#39;ון שלושה סוקרים אנונימיים על הערותיהם שסייעו לנו לשפר את הווידאו ואת כתב היד.

1. צמחים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קטעי גזע בודד מצמחים בוגרים משמשים יחידות הניסוי. קטעי הם גזומים עד 10 ס"מ כדי להבטיח אחידות של חומר השתילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למנוע זיהום על ידי פתוגנים צמח, קטעי נשטפים פתרון 3% נתרן hypochlorite דקות 2 ושטף אז thoughroughly עם מי ברז. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חיתוך כל נטועים CA. 36 גרם של אדמה סטרילית בצינור PVC גלילי (5.3 ס"מ קוטר בחוץ על ידי גובה 6.5 ס"מ) חתם בסוף נמוך עם כוס קלקר, כתרים עם התותב PVC. חיתוך הוא מוחזק במקום על ידי טבעת קצף להציב הפתיחה המרכזי של התותב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צמחים הם מופרית והשקה ככל הנדרש כדי לשמור על לחות הקרקע הולם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צמחים יגדלו במשך חודש אחד לפני מאוימת על ידי חרקים, המאפשר התפתחות של שורשים שטחיים, המהווים האכלה אתרים עבור שורש העצה האכלה נימפות spittlebug. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צינורות PVC עם ייחורים מושרשים הם הפוכים עבור ד 8 לפני שריצה כדי לעורר עוד יותר את הצמיחה של השורשים שטחית, התאמה חלקית הבדלים הטבועים ארכיטקטורה שורש. צעד זה דורש מקור אור מלאכותי, אשר אנו מספקים היום 24 חה. כדי למנוע בלבול בורח מן herbivory בהתנגדות אוכלי עשב, צמחים בודדים משכפל עם שורשים שטחיים או לא מעטים לאחר טיפול זה היפוך מסולקות מן הניסוי. חיסול זה צריך להיות נדיר, לא מוביל לחיסול גנוטיפ שהם מייצגים. </li></ol> 2. חרקים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Spittlebugs למבוגרים נאספים מן השדה, מזוהה למינים, והציג את כלובי ההטלה שבו הם ניתנים העלווה של brachiariagrasses רגישים ניזונים. הנקבות מטילות את ביציהן באדמה הכלול מגש נשלף רדוד דגש על החלק התחתון של הכלובים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי כמה ימים, אדמת מושעה במים עברו סדרה של הנפות (42, 60 ו - 150 רשת) כדי לאסוף את הביצים. השעיית החומר הסתנן בתמיסת מלח 30% גורמת ביצים בוגרת לצוף, והותיר אחריו ביצים בשלה וכל חומר אורגני שיורית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי למנוע זיהום על ידי פתוגנים חרקים, ביצים הם פתרון וחיטוי ב 0.5% נתרן hypochlorite במשך 5 דקות ולאחר מכן לשטוף עם מים מזוקקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל צמח הבדיקה (יחידה ניסיונית) הוא שורץ על פני האדמה עם שש ביצים בוגרת. רק ביצים בוגרים קרוב הבקיעה נבחרים מכת. הם יכולים להיות מזוהים על ידי נוכחות של שתי נקודות אדומות בחלק הקדמי שלהם, המתאים לעיניים של חרקים; סימני ורוד בחלק האחורי שלהם, המתאים הבטן של החרק, לבין operculum מלא מורחבת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בקיעה מוצלחת היא אישרה 4 ד מאוחר יותר, ובשלב זה כל ביצה שלא נתבקעה מוחלפת spittlebug רך נולד מן המושבה שלנו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צמחים מבחן מסודרים עיצוב לחסום אקראי שלם עם שישה משוכפלים לכל גנוטיפ. </li></ol> 3. הערכות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הניסוי מוערכת CA. לאחר שריצה 30 ד (פעמים המדויק משתנה בהתאם למין החרק למד). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנזק הוא הבקיע בסולם 1-5 ויזואלית, כאשר 1 מתאים נזק לא גלוי 5 המתאים לצמח מת (איור 1). ניקוד נזק המפעל מספק אומדן של סובלנות. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3047/3047fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> 1. איור נזק בקנה מידה להערכת סובלנות spittlebug herbivory ב Brachiaria spp. 1 = אין נזק לזיהוי; 2 = העלווה נמקי 0-25%, 3 = העלווה נמקי 25-50%, 4 = העלווה נמקי 50-75%, 5 = עלווה נמקי 75-100%. <ol start="3" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הישרדות חרקים נבחנת על ידי ספירת חרקים לכת או instar הסופי שלהם או בשלב הבוגר (איור 2). ניקוד להישרדות החרקים מספק אומדן של antibiosis. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3047/3047fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> 2. איור Spittlebug הפיתוח הראשון instar (משמאל) עם אדם מבוגר (מימין). חרקים רק להגיע לפחות instar הסופי שלהם (חיצים) במועד הערכה נחשבים "ניצולים". 4. נציג תוצאות תוצאות מ ההקרנה נציג assay כלאיים Brachiaria להתנגדות Aeneolamia spittlebug reducta מוצגים באיור 3. <img src="/files/ftp_upload/3047/3047fig3.jpg" alt="איור 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> איור 3. תוצאות ההקרנה כלאיים Brachiaria להתנגדות spittlebug Aeneolamia reducta. אנו רואים צמחים עמידים אם תגובתם herbivory נופל בחצי התחתון של העלילה הזאת. Antibiosis מגביר מימין לשמאל וסובלנות מגביר מלמעלה למטה. החיצים מצביעים על בדיקות עמידות שלנו.

<ol><li>Painter, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPainter%2C+R+%22Insect+resistance+in+crop+plants%22">Insect resistance in crop plants</a>. , Mcmillan. (1951).</li>
<li>Kogan, M., Ortman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antixenosis-a+new+term+proposed+to+define+Painter%27s+%27Nonpreference%27+modality+of+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Bull.+Entomol.+Soc.+Am%22%5BJournal%5D)">Antixenosis-a new term proposed to define Painter's 'Nonpreference' modality of resistance.</a> Bull. Entomol. Soc. Am. 24, 175-176 (1978).</li>
<li>Kennedy, G., Gould, F., Deponti, O., Stinner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecological%2C+agricultural%2C+genetic%2C+and+commercial+considerations+in+the+deployment+of+insect-resistant+germplasm%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Ecological, agricultural, genetic, and commercial considerations in the deployment of insect-resistant germplasm.</a> Environ. Entomol. 16, 327-338 (1987).</li>
<li>Holmann, F., Peck, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Economic+damage+of+grassland+spittlebugs+%28Homoptera+Cercopidae%29+in+Colombia%3A+a+first+approximation+of+impact+on+animal+production+in+Brachiaria+decumbens%5BTitle%5D)+AND+%22Neotrop.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Economic damage of grassland spittlebugs (Homoptera Cercopidae) in Colombia: a first approximation of impact on animal production in Brachiaria decumbens.</a> Neotrop. Entomol. 31, 275-284 (2002).</li>
<li>Miles, J. W., Cardona, C., Sotelo, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recurrent+selection+in+a+synthetic+brachiariagrass+population+improves+resistance+to+three+spittlebug+species%5BTitle%5D)+AND+%22Crop+Sci%22%5BJournal%5D)">Recurrent selection in a synthetic brachiariagrass population improves resistance to three spittlebug species.</a> Crop Sci. 46, 1088-1093 (2006).</li>
<li>Ferrufino, A., Lapointe, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+plant+resistance+in+Brachiaria+grasses+to+the+spittlebug+Zulia+colombiana%5BTitle%5D)+AND+%22Entomol.+Exp.+Appl%22%5BJournal%5D)">Host plant resistance in Brachiaria grasses to the spittlebug Zulia colombiana.</a> Entomol. Exp. Appl. 51, 155-162 (1989).</li>
<li>Lapointe, S. L., Serrano, M. S., Arango, G. L., Sotelo, G., Cordoba, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibiosis+to+spittlebugs+%28Homoptera%3A+Cercopidae%29+in+accessions+of+Brachiaria+spp%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Econ.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Antibiosis to spittlebugs (Homoptera: Cercopidae) in accessions of Brachiaria spp.</a> J. Econ. Entomol. 82, 1764-1766 (1992).</li>
<li>Cardona, C., Miles, J. W., Sotelo, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+methodology+for+massive+screening+of+Brachiaria+spp.+genotypes+for+resistance+to+Aeneolamia+varia+%28Homoptera%3A+Cercopidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Econ.+Entomol%22%5BJournal%5D)">An improved methodology for massive screening of Brachiaria spp. genotypes for resistance to Aeneolamia varia (Homoptera: Cercopidae).</a> J. Econ. Entomol. 92, 490-496 (1999).</li>
<li>Cardona, C., Fory, P., Sotelo, G., Pabon, A., Diaz, G., Miles, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibiosis+and+tolerance+to+five+species+of+spittlebug+%28Homoptera%3A+Cercopidae%29+in+Brachiaria+spp.%3A+implications+for+breeding+for+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Econ.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Antibiosis and tolerance to five species of spittlebug (Homoptera: Cercopidae) in Brachiaria spp.: implications for breeding for resistance.</a> J. Econ. Entomol. 97, 635-645 (2004).</li>
<li>Smith, C., Khan, Z., Pathak, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSmith%2C+C+%22Techniques+for+evaluating+insect+resistance+in+crop+plants%22">Techniques for evaluating insect resistance in crop plants</a>. , CRC Press. (1994).</li>
<li>Lapointe, S., Sotelo, G., Arango, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+for+rearing+spittlebugs+%28Homoptera%3A+Cercopidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Econ.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Improved technique for rearing spittlebugs (Homoptera: Cercopidae).</a> J. Econ. Entomol. 82, 1764-1766 (1989).</li>
<li>Lopez, F., Cardona, C., Miles, J. W., Sotelo, G., Montoya, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Screening+for+resistance+to+adult+spittlebugs+%28Hemiptera%3A+Cercopidae%29+in+Brachiaria+spp.%3A+methods+and+categories+of+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Econ.+Entomol%22%5BJournal%5D)">Screening for resistance to adult spittlebugs (Hemiptera: Cercopidae) in Brachiaria spp.: methods and categories of resistance.</a> J. Econ. Entomol. 102, 1309-1316 (2009).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

אפלייה בין מנגנוני עמידות אוכלי עשב יכולה להאיר גידול יבול המאמצים 3. ההתנגדות מבוססת על antibiosis חזק יכול, בנסיבות מסוימות, ליצור לחצים הבחירה biotypes מזיקים יותר אגרסיביים. מצד שני, התנגדות המבוססת על סובלנות עלולה לאפשר לאוכלוסיות הדברה כדי להגדיל עד סובלנות בסופו של דבר הוא המום. גידול להתנגדות עמיד, ולכן מחייב בחינה זהירה של מה מנגנוני עמידות יהיה להעניק יציבות ביותר לגידול מסוים / מערכת המזיק [ראו קנדי ​​et al. (1987) לדיון מקיף בנושא] 3. זו הפגנה וידאו מבוסס על מחקרים קודמים מספר תוכנן לאמוד את התרומה היחסית של antibiosis וסובלנות להתנגדות spittlebug ב brachiariagrasses 6-9. בניגוד בדיקות בחירה או ניסויי שדה, אין ברירה בדיקות להבטיח כל הצמחים מקבלים את אותו הלחץ אוכלי עשב, ובכך לספק בקרה על ההבדלים הנובעים התנהגות אוכלי עשב (למשל, העדפה המארח, צבירה). מסיבה זו, עם זאת, אין ברירה המבחנים אינם מתאימים כדי להעריך את ההתנגדות antixenosis. גידול מלאכותי מושבות חרקים היא השיטה המועדפת להשיג חרקים מבחן להקרנה מבחני עמידות 10. מושבות לספק מקור אמין ואחיד של spittlebugs בגיל ידוע ניסויים להתנהל בכל עת של השנה 11. יתכן, עם זאת, יש צורך מעת לעת להחדיר אנשים פראיים לתוך המושבה על מנת להבטיח כי המושבה לא לסטות גנטית מאוכלוסיות בתחום הרלוונטי 10. כדי להעריך את כושר אלה אוכלי צמחים, שגדלו באופן מלאכותי, ולעקוב אחר שינויים אפשריים האגרסיביות שלהם לאורך זמן, חשוב כי כל הקרנות כוללות בדיקות מתאימות של רמות התנגדות ידוע. פרמטרים מרובים יש להגדיר בקפידה לעצב assay המתאים ההקרנה התנגדות. כמה פרמטרים מרכזיים שקלנו לעצב הבדיקה שלנו כוללים את גילו של הצמחים המארח, את המין שלב התפתחותי של spittlebugs, רמת נגיעות, ומשך קשר צמחים חרקים 8,9,12. מספר סבבי ניסויים ועידון פרוטוקול עשוי להיות נחוץ כדי להגיע אל מהיר, יעיל וחסכוני assay, אמין כראוי צופה התנגדות אוכלי עשב בשדה.

אפיון מנגנוני ההתנגדות אוכלי עשב: spittlebugs על brachiaria spp. כדוגמה

Characterizing Herbivore Resistance Mechanisms: Spittlebugs on Brachiaria spp. as an Example

צמחים יכולים להתנגד נזק אוכלי עשב באמצעות שלושה מנגנונים רחב:, antixenosis antibiosis וסובלנות 1. Antixenosis היא באיזו מידה את המפעל הוא נמנע כאשר אוכלי עשב הוא מסוגל לבחור צמחים אחרים 2. Antibiosis היא המידה שבה הצמח משפיע על הכושר של אוכלי עשב ניזונים זה 1. סובלנות היא המידה שבה הצמח יכול לעמוד או לתקן נזק שנגרם על ידי אוכלי עשב, מבלי להתפשר על צמיחה של אוכלי עשב ורבייה 1. עמידות ההתנגדות אוכלי עשב בסביבה חקלאית תלוי במידה רבה על מנגנון התנגדות העדיפו במהלך הרבייה מאמצים יבול 3. אנו מדגימים את הניסוי אין ברירה שנועדו להעריך את התרומה היחסית של antibiosis וסובלנות להתנגדות spittlebug ב Brachiaria spp. כמה מינים של עשבים אפריקאי של Brachiaria הסוג הם מספוא ערך וצמחי מרעה את Neotropics, אבל הם יכולים להיות אתגר חמור על מינים מקומיים כמה spittlebugs (Hemiptera: Cercopidae). 4 על מנת להעריך את התנגדותם spittlebugs, הצמחים הם vegetatively-מופצות על ידי ייחורים גזע מותר לגדול במשך כחודש, מה שמאפשר את צמיחת השורשים שטחית שבו spittlebugs יכול להאכיל. בשלב זה, כל צמח בנפרד מבחן תגר עם שש ביצים spittlebug ליד הבקיעה. מכת מותר התקדמות במשך חודש לפני הערכת הנזק צמחים הישרדות חרקים. ניקוד נזק המפעל מספק אומדן של סובלנות תוך הבקיע הישרדות חרקים מספק אומדן של antibiosis. פרוטוקול זה יש להקל להשבחת צמחים המטרה שלנו כדי לשפר את עמידות spittlebug ב brachiariagrases מסחרי 5.

וידאו זה מסביר מנגנוני עמידות הצמח הפונדקאי herbivory ומדגים מבחן אין ברירה כי הערכות את התרומה היחסית של antibiosis וסובלנות spittlebug ההתנגדות<em&gt; Brachiaria</em&gt; Spp.

אפיון מנגנוני ההתנגדות אוכלי עשב: Spittlebugs על Brachiaria Spp. כדוגמה

צמחים יכולים לעמוד בפני נזקי תולעים (herbivores) באמצעות שלושה מנגנונים רחבים: אנטיקסנוזיס (antixenosis), אנטיביוזיס (antibiosis) וסבילות (tolerance)1. אנטיקסנוזיס הוא המידה שבה הצמח הוא...

שלום, שמי Ush Bara ואני אנטומולוג במרכז הבינלאומי לחקלאות טרופית. המטרה הכללית היא להדגים בסרטון שיטה לאפיון מנגנוים של עמידות צמחי מאכסן לחרקים, כחלק ממאמצים משותפים ביוזמת ההכלאה שלנו לשיפור העמידות לפשפשי רשת (spit bug). דגשאיים (grasses) ישמשו כדוגמה במקרה זה.פשפשי הרוק הם מזיקים חמורים של דגשנים רבים בעלי חשיבות כלכלית, כולל מרעות טרופיות, קנה סוכר ותירס. במרעות הטרופיות של אמריקה, צמחים השייכים לסוג gen bacteria הם המאכילים החשובים ביותר שלהם. צמח יכול לעמוד בפני נזקי עשבונייה באמצעות שלושה מנגנונים רחבים.אנטיביוזיס (Antibiosis), אי-סבילות, המכונה לעיתים חוסר העדפה, היא המידה שבה הצמח נמנע כאשר בעל החיים הצמחוני מסוגל לבחור צמחים. אנטיביוזיס מזוהה בדרך כלל בניסויי בחירה שבהם לבעלי החיים הצמחוניים ניתנת גישה ליותר מגנוטיפ אחד. אנטיביוזיס היא המידה שבה הצמח משפיע על הכשירות (fitness) של בעל החיים הצמחוני הניזון ממנו.לבסוף, סובלנות (tolerance) היא המידה שבה הצמח יכול לעמוד בנזק שנגרם על ידי ה-HBO או לתקן אותו, מבלי לפגוע בצמיחתו וברבייתו של ה-HBO. הן אנטיביוטיקה והן סובלנות מזוהות בצורה הטובה ביותר בבדיקות ללא ברירה (no choice tests), שבהן ה-hbos מוגבלים ולכן נאלצים להזין מצמח יחיד. הסרטון שלנו ידגים בדיקה ללא ברירה שנועדה להעריך חוסר סובלנות לאנטיביוטיקה, spit bug IV. בעשבי שדה מסוג aria grasses, עמידות הצמח המאכיל היא טקטיקה מרכזית לניהול ה-spit bug.עם זאת, עמידות המבוססת על אנטיביוטיקה חזקה עלולה ליצור לחצי ברירה עבור ביוטייפים של מזיקים וירולנטיים יותר. מאידך, עמידות המבוססת על סבילות תאפשר לאוכלוסיות של spit dog להמשיך לגדול עד שהמספרים יכריעו את הצמח. לפיכך, עמידות בת-קיימא עשויה לדרוש רמות מסוימות הן של אנטיביוטיקה והן של סבילות.פרוטוקול זה ידגים כיצד להעריך את התרומה היחסית של כל אחד מהגורמים לעמידות של spit bug. גנוטיפים של Aria Aria הגיעו ממאגר הנבטים (germ Plasm Bank) של המרכז הבינלאומי לחקלאות טרופית. הצמחים הופקו רבייתיות מcutting של גבעול בודד, מצמחים בוגרים ששימשו כיחידות ניסוייות.הייחורים נגזמים לאורך של 10 centimeters כדי להבטיח אחידות של חומר השתילה ולמנוע זיהום על ידי פתוגנים צמחיים. הייחורים נשטפים בתמיסת sodium HypoChlor בריכוז 3% למשך שתי דקות ולאחר מכן נשטפים ביסודיות במי ברז. כל ייחור נשתל בכ-36 grams של קרקע סטרילית בתוך צינור PVC שנאטם בחלקו התחתון באמצעות כוס קלקר ונסגר בעזרת תושבת PVC.הייחור מוחזק במקומו על ידי טבעת ספוג המוצבת בפתח המרכזי של התושבת. הצמחים מקבלים דישון ויש לספק מים כדי לשמור על לחות קרקע נאותה. הצמחים יגדלו במשך חודש לפני החשיפה לחרקים, מה שמאפשר התפתחות של שורשים שטחיים המשמשים כאתרי הזנה עבור הזנת שורשים.הפיכת הצמחים ב-NIMS של ביצת הרוק למשך שמונה ימים לפני ההדבקה מעודדת עוד יותר את צמיחת השורשים השטחיים, ובכך מתקנת חלקית הבדלים מולדים בארכיטקטורת השורשים. שלב זה דורש מקור אור מלאכותי, אותו אנו מספקים 24 שעות ביממה. צמחים עם מעט שורשים שטחיים או ללא שורשים שטחיים כלל.לאחר מכן, טיפול היפוך זה מושמט מהניסוי. 30 ימים לאחר השתילה, כל צמח מזוהם בפני השטח של הקרקע באמצעות שש ביצי בוגרות שהושגו מקולוניות הציפוליים שלנו. כדי להקים קולוניות אלו, נאספים ציפוליים בוגרים מהשדה, מזוהים ברמת המין, ומוכנסים לכלובי גידול שבהם הם מקבלים עלווה של צמחי aria רגישים להזנה. הנקבות מטילות את ביציהן בקרקע הנמצאת במגש רדוד המוצב בתחתית הכלובים.לאחר מספר ימים, תולה את הקרקע במים ומעבירה אותה דרך סדרה של נפות כדי לאסוף את הביצים. תליה של החומר המסונן בתמיסת מלח 30% גורמת לביצים הבשלות לצוף, בעוד ביצים שאינן בשלות נשארות על שאריות של חומר אורגני. כדי למנוע זיהום על ידי פתוגנים של חרקים, מחטאים את הביצים בתמיסת sodium hypochlorite 0.5% למשך חמש דקות ולאחר מכן שוטפים במים מזוקקים; רק ביצים בשלות הקרובות לבקיעה נבחרות להדבקה.ניתן לזהות אותם על ידי נוכחות של שתי נקודות אדומות בחלק הקדמי המתאימות לעיני החרק. סימונים ורודים בחלק האחורי המתאימים לבטן החרק, וספירקולום (spiracle) פתוח לחלוטין. בקעה מוצלחת מאושרת ארבעה ימים מאוחר יותר, ובנקודה זו כל ביצה שלא בקעה מוחלפת בבלוק ביצים של ניאונט (neonate).מבדיקת המושבה שלנו. הצמחים מסודרים בתכנון בלוקים מלאים אקראי עם שש חזרות. הניסוי מוערך כ-30 יום לאחר ההדבקה.דירוג נזקי הצמח מספק הערכה של רמת הסבילות. בעוד שדירוג הישרדות חרקים מספק הערכה של יעילות האנטיביוטיקה. הנזק מדורג באמצעות סולם ויזואלי של אחת עד חמש, כאשר אחת מקבילה להיעדר נזק נראה וחמש מקבילה למות הצמח.בתורו, נמדד ההישרדות על ידי ספירת החרקים המגיעים למבחנה הסופית שלהם או לשלב הבוגר. כדי לסווג מנגנוני עמידות, מומלץ להציג את התוצאות באמצעות תרשים פיזור, שבו הישרדות החרקים מופיעה על ציר ה-x והנזק לצמח על ציר ה-Y. העמידות עולה ככל שנעים מימין לשמאל.מצד שני, הסבילות עולה ככל שנעים מלמעלה למטה. אנו מחשיבים צמחים כעמידים אם התגובה לאוכל העשב נמצאת בחציו התחתון של תרשים זה. אם תגובה זו נמצאת ברביע השמאלי, מנגנון העמידות הדומיננטי הוא אנטיביוטיקה.אם התגובה נופלת על הרבע הימני, מנגנון העמידות הדומיננטי הוא סבילות. להלן דגימה מייצגת של נתוני הסריקה שלנו. הנקודות בחלק העליון מייצגות צמחים רגישים.הנקודות ברביע השמאלי התחתון מייצגות צמחים העמידים הודות לאנטיביוטיקה. הנקודות ברביע הימני התחתון מייצגות צמחים העמידים הודות לסבילות. צפינו כעת בהדגמה של בדיקת "חוסר בחירה" (no choice assay) להערכת התרומות היחסיות של אנטיביוטיקה וסבילות לעמידות הצמחים בכל מקרה שבו הדבר פועל.אנו משתמשים בעמידות של Aria לחרקי רוק כדוגמה, אך העקרונות המוצגים אמורים להיות רלוונטיים למערכות אחרות. אנו מקווים שהסרטון שלנו יעזור לכם במאמצים שלכם. בהצלחה.

characterizing-herbivore-resistance-mechanisms-spittlebugs-on

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

עמידות הצמח אל אוכלי צמחים חרקים לעיסה ניתן לבדוק בכמה דרכים. כאן, אנו מדגימים כיצד הגדרת בחירה ניסוי אין ברירה עם thaliana הצמח ארבידופסיס מודל לזהות התנגדות המינים הדברה פיאריס ראפא.

בחירה אין ברירה מבחני לבחינות ההתנגדות של thaliana א &#39;חרקים לעיסת

שיטה שכיבות למשוך לאיסוף נדיפים צמח מתואר. השיטה מאפשרת השוואה של נדיפים המושרה על ידי האכלה אוכלי עשב, jasmonate מתיל אקסוגניים, ונזק מכני. טכניקה זו משמשת גם כדי לחקור את התגובה נדיפים ענפים ניזוק חשיפה נדיפים מענפי אוכלי עשב שניזוק בתוך צמחים אוכמניות.

אוכלי עשב הנגרמת נדיפים אוכמניות צמח תוך איתות

פרוטוקול זה מדגים שתי שיטות חיסון להציג entomopathogen...

הקמת Entomopathogens פטרייתיים כEndophytes: לקראת ההדברה ביולוגית Endophytic

פרוטוקולים להכנה יעילה של דגימות אחידות של קרדית עכביש, התפשטות של צמחים ניסיוניים, והערכה של נזק צמח, כפי שנדרש למחקרים של אינטראקציה בין צמחים למזיקים פותחו.

יישום של קרדית העכביש הבחין-Two<em&gt; Tetranychus urticae</em&gt; לאינטראקצית צמח-מזיקים ללימודים

מוצגת גישה חזקה וגמישה לאישור עמידות לקוטלי עשבים באוכלוסיות עשבים. פרוטוקול זה מאפשר להסיק את רמות העמידות לקוטלי עשבים וליישם אותן על מגוון רחב של מיני עשבים וקוטלי עשבים עם התאמות קלות.

פרוטוקולים לקוטל עשבים חזקים התנגדות בדיקה במיני עשבים שונים

כימות צמיחת פתוגנים הוא כלי רב עוצמה לאפיון תגובות חיסוניות שונות של Arabidopsis thaliana (להלן: Arabidopsis). השיטה המתוארת כאן מציגה בדיקת חדירת מזרק אופטימלית לכימות Pseudomonas syringae pv. מקוליקולה גידול ES4326 בעלים בוגרים של Arabidopsis.

חיידקי עלה הסתננות Assay עבור אפיון פיין של תגובות הצמחים ביטחון באמצעות<em&gt; Thaliana-Pseudomonas ארבידופסיס syringae</em&gt; Pathosystem

אנו מציגים כמדריך חזותי כדי מחלת ההגנה התנהגויות חיתוך עלה נמלים, עם קליפים בודדים והגדרות הנלווה, מאויר בתרחיש של זיהום ניסיוני. המטרה העיקרית שלנו היא כדי לסייע לחוקרים אחרים לזהות התנהגויות הגנתית מפתח וכדי לספק הבנה משותפת למחקר עתידי בתחום זה.

מדריך חזותי ללמוד ההגנות התנהגותית כדי הפתוגן בפיגועי חיתוך עלה נמלים

השיטה המוצגת יוצרת הרביוור טבעי הנזק רקמת הצמח באמצעות היישום של מנדוקה הזחלים סקסטה להתנתק עלים של תפוחי אדמה. רקמת הצמח הוא הבעה ביטוי של שישה שעתוק גורם הומויומני מעורב בתגובות מוקדמות לחרקים העשב.

מנותקת עלה assays לפשט גנים ביטוי לימודי תפוחי אדמה במהלך התפשטות על ידי לעיסת חרק manduca סקסטה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה לאיסוף מספיק רוק מחרקים יונקים באמצעות מדיום מלאכותי. זוהי שיטה נוחה לאיסוף רוק חרקים וחקר תפקוד הרוק על התנהגות האכלת חרקים והעברת וירוסים המועברים בווקטורים.

שיטת כריך ממברנה דו שכבתית עבור אוסף הרוק של לאודלפקס

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה להשראת פיזור של צעירים בשלב השלישי (צעירים טרום-דאואר, JIII.) של Bursaphelenchus xylophilus לקריפטוביוזיס באמצעות ויסות אוסמוטי של יוני אשלגן כלורי (KCl). שיטה זו יכולה לספק תמיכה טכנית למחקר על מנגנוני עמידות הלחץ של B. xylophilus.

גרימת כניסתם של צעירי פיזור שלב שלישי של Bursaphelenchus xylophilus לקריפטוביוזיס באמצעות ויסות אוסמוטי

למדו את שיטת מבחן הבחירה-הכפויה לאפיון מנגנוני ההתנגדות של צמחים לנזקי אכילה ב-Brachiaria. פרוטוקול זה מסייע לחקור את תרומת האנטיביוזיס והסובלנות לניהול מזיקי הדובון.

אפיון מנגנוני ההתנגדות אוכלי עשב: Spittlebugs על Brachiaria Spp. כדוגמה

גלה סרטונים נוספים