אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 3:00 דק׳ • July 8th, 2025
במהלך זיהום בנגיף השפעת, הנגיף נכנס לתא דרך אנדוציטוזיס וחוטף את מנגנון התא המארח, ומייצר נגיפים צאצאים. אלה משתחררים, מדביקים תאים שכנים וגורמים למפל של זיהום.
כדי למדוד את היחס בין נגיף השפעת הזיהומית לתאים בתרבית - ריבוי הזיהום - הוסף צפיפות מתאימה של תרחיף תאי יונקים שהושג לאחרונה לתוך צלחת מיקרוטיטר.
הצלחת מכילה מיקרו-אלקטרודות זהב למדידת עכבה המוטבעות בתחתית הבאר. דגירה, המאפשרת לתאים להיצמד לקרקעית הבאר ולהגיע לשלב הצמיחה האקספוננציאלי לפני ההדבקה.
הפעל פוטנציאל חשמלי קטן בין המיקרואלקטרודות. תאים הנצמדים למיקרו-אלקטרודות פועלים כמבודדים, מגבילים את זרימת הזרם ומגבירים את ההתנגדות החשמלית - העכבה - הנמדדת.
הסר את המדיה. פיפטה השעיית נגיף השפעת לבארות. תוסף עם סרין אנדופרוטאז מתאים.
במהלך הדגירה, הסרין אנדופרוטאז מתבקע ומפעיל את הגליקופרוטאין הנגיפי המגלוטינין, מה שמקל על קשירתו לקולטני תאי מארח ספציפיים ולכניסת תאי הנגיף לאחר מכן.
באמצעות מנגנון התא המארח, חלקיקים נגיפיים חדשים מיוצרים ומשתחררים, ומדביקים תאים שכנים. כתוצאה מכך, התאים הנגועים בנגיף עוברים שינויים מורפולוגיים ומציגים השפעות ציטופתיות, מה שמוביל למוות של תאים - תאים מתנתקים משטח המיקרואלקטרודה, ומפחיתים את העכבה לאורך זמן.
קבע את הזמן שלוקח לעכבה להפחית למחצית מהעכבה הראשונית לפני הוספת הנגיף. מסגרת זמן קצרה י
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים