אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 2:52 דק׳ • July 8th, 2025
נגיפים נקשרים לקולטן התא המארח ומפנימים לאנדוזום. הממברנה האנדוזומלית מתמזגת עם הממברנה הנגיפית, ומשחררת תוכן ויראלי בתוך התא.
עם הגעתו לגרעין, הגנום הנגיפי מתמלל ל-mRNA ומאוחר יותר מתורגם ליצירת חלבונים ויראליים. הרכיבים הוויראליים נכנסים לציטופלזמה ומתאספים לוויריונים, שצובטים החוצה מהתא וגורמים להשפעות ציטופתיות - שינויים במורפולוגיה של התא המארח ומוות.
כדי להעריך את קינטיקה של הישרדות הנגיף על ידי מדידת עכבת תא מארח, קח צלחת מרובת בארות המצופה במיקרו-אלקטרודות למדידת עכבה בתחתיתה. הוסיפו תרחיף של תא מארח לבארות, ודגרו כדי לאפשר לתאים להיצמד למשטח האלקטרודה ולגדול.
לאחר מכן, קח תרחיפים נגיפיים שטופלו מראש עם עומסים נגיפיים שונים. טיפול במי מלח מספק לנגיף כלוריד, המייצר חומצה היפוכלורית שהורגת אותו - ומפחית את ההדבקה הוויראלית. הוסף את התרחיפים הוויראליים הללו לבארות שלהם.
מדוד את העכבה התאית - תופעה של התנגדות לזרימת הזרם החשמלי דרך האלקטרודות - על ידי התאים הדבקים.
נגיפים מדביקים תאי מארח דבקים ומשנים את המורפולוגיה שלהם, וגורמים לניתוק התאים המשתנים מהאלקטרודות. עם הזמן, ככל שיותר תאים נדבקים, העכבה התאית המתווכת על ידי התא המארח פוחתת.
שרטט את מדד התא, שהוא השינוי בעכבה עקב ניתוק תאים נגועים, לאורך זמן.
כדי להעריך את קינטיקה של הישרדות נגיף השפעת A, הוסף נתרן כלורי לריכוז סופ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים