טכנולוגיית אינטרפרומטריה ביו-שכבתית לזיהוי אינטראקציות בין ליגנד לאנליט

כדי לזהות אינטראקציות ליגנד-אנליט באמצעות אינטרפרומטריית ביו-שכבה, BLI, התחל עם חיישן ביולוגי סיב אופטי מיובש המקובע על תושבת מכשיר BLI, המוגדר לתוכנית הרצויה.

קצה החיישן הביולוגי מצופה בשכבה תואמת ביולוגית המשותקת בחומצה ניקל-ניטרילוטריאצטית, Ni-NTA, קבוצות. טבלו את קצה החיישן הביולוגי במאגר.

המכשיר פולט אור לבן לעבר החיישן הביולוגי, המוחזר משני ממשקים: שכבת הייחוס הפנימית או האופטית, והשכבה התואמת ביולוגית. הקרניים המוחזרות מפריעות באופן קונסטרוקטיבי או הרסני באורכי גל שונים של אור. גלאי פוטו מזהה את דפוס ההפרעה המתקבל.

לאחר מדידת תגובה אינטרפרומטרית בסיסית, הוסף תמיסת ליגנד מתויגת היסטידין. תגי היסטידין נקשרים לקטיוני ניקל על החיישן הביולוגי, ומשתקים ליגנדים בקצה.

בעקבות השיוך, האור הלבן הנפלט מוחזר מהשכבה האופטית, והשכבה הביו-תואמת משותקת עם ליגנדים בעלי עובי אופטי מוגבר בקצה. זה מגדיל את המרחק בין השכבות הרפלקטיביות, וגורם לשינוי דפוס התאבכות ושינוי אורך גל.

שטפו את הקצה, הסירו ליגנדים לא קשורים. דגירה עם תמיסת אנליט מטרה. האנליט נקשר לליגנד, מגדיל עוד יותר את העובי האופטי בקצה, וגורם לשינוי אורך גל מוגבר.

מקם את קצה החיישן הביולוגי במאגר. רשום את שינוי אורך הגל במהלך דיסוציאציה אנליטית מהליגנד המשותק בקצה.

ניטור השינוי בשינוי אורך הגל לאורך זמן מקל על חקר האינטראקציות המולקול