אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 5:21 דק׳ • July 8th, 2025
כדי לבצע תהודה של פלזמון פני השטח, או SPR, לחקר האינטראקציות הביו-מולקולריות, התחל עם שבב חיישן הממוקם מעל גלאי SPR בתא זרימה. לשבב חיישן מצופה מתכת זה יש שכבה של חומר הידרוג'ל המופקדת על פני השבב, מה שהופך אותו למתאים יותר לקיבוע חלבונים.
כיסו את השבב בפפטידים נגיפיים, המקיימים אינטראקציה עם ההידרוג'ל ומשתקים על פני השטח. שטפו עם תמיסת מרווה אלקליין המונעת אינטראקציות חלבון לא ספציפיות.
הפנה אור מקוטב ישירות אל השבב. בזווית התהודה, אלקטרוני המתכת סופגים את האור הזה ומהדהדים, ומפחיתים את עוצמת האור המוחזר בזווית המוחזרת המתאימה.
הפוטו-גלאי אוסף את האור המוחזר הזה, והמעבד ממיר את האות הזה לקו הבסיס, ויוצר חיישן - גרף המייצג את תגובת החיישן כנגד הזמן.
הזרם תמיסה של חומר אנטי-ויראלי לתא הזרימה. במהלך הזרימה, החומרים האנטי-ויראליים מקיימים אינטראקציה עם הפפטידים הנגיפיים המשותקים על השבב. אסוציאציה זו משנה את מקדם השבירה, המשנה את הזווית והעוצמה של האור המוחזר, ובסופו של דבר, וכתוצאה מכך תגובת חיישן.
הוסף מאגר כביסה בעל חוזק יוני גבוה המשבש את האינטראקציה בין שתי המולקולות, מה שמוביל לדיסוציאציה שלהן ולהפחתת תגובת החיישן.
לנתח את צורת החיישן ולהעריך את האסוציאציה והדיסוציאציה של שתי המולקולות החיוניות באינטראקציות ביו-מולקולריות.
עבור מערכת SPR דו-ערוצית, השתמש ב-HBS-EP+ כמאגר פועל, חו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים