אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
טכניקות ביולוגיות
0 צפיות • 3:43 דק׳ • July 8th, 2025
כדי לחקור את האינטראקציה של חלבונים עם מולקולות שומנים, התחל עם שני צינורות נימיים. הוסף לאחד מהם חלבוני בדיקה עם תווית צבע פלואורסצנטי בשתי השפופרות ומולקולות שומנים ללא תווית. הנח את הנימים הללו במערך והנח אותם בתוך מכשיר תרמופורזה בקנה מידה מיקרו.
להקרין את הנימים המכילים חלבון באור אינפרא אדום ממוקד, ליצור עליית טמפרטורה בנקודת המוקד המתפזרת דרך התמיסה, ויוצרת שיפוע טמפרטורה בתוך אזור צר המכיל חלבונים המסומנים בפלואורסצנט.
גלאי הקרינה אוסף את אות הקרינה מאותה נקודה של הנימים - שם הלייזר ממוקד. המעבד ממיר את האות ומייצר עלילה של הקרינה היחסית כפונקציה של זמן.
בשיפוע טמפרטורה, חלבונים מסומנים מתחילים לנדוד מהאזור החם יותר לאזור הקריר יותר, ומציגים תרמופורזיס, תופעה של נדידה תלוית טמפרטורה.
עקב תרמופורזיס, עוצמת הקרינה פוחתת בהדרגה עם הזמן ומגיעה למצב יציב, שבו חלבונים מסומנים מגיעים לשיווי משקל.
הקרינו את הנימים המכילים תערובת חלבון-שומנים, ויוצרים שיפוע טמפרטורה.
במהלך התרמופורזה, החלבונים המסומנים הנודדים מקיימים אינטראקציה עם מולקולות השומנים, ויוצרים קומפלקסים של חלבון שומנים עם מסה מולקולרית גבוהה יותר. זה מוביל לעיכוב בתנועתם.
הגירה דיפרנציאלית זו גורמת לשינוי בקרינה, ומאשרת אינטראקציה מוצלחת בין חלבון לשומנים.
לפני תחילת ניתוח, הפעל את מתג ההפעלה בגב מכשיר ה-MST ופתח את תו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים