טכניקת מיקרו-כבידה מפזרת לחקר אינטראקציה דו-שכבתית חלבון-שומנים

כדי לחקור את האינטראקציה בין חלבון קושר פוספוליפידים לשכבת שומנים דו-שכבתית באמצעות מיקרוגרבימטריה מפזרת, קח מיקרו-איזון עם חיישן קוורץ. עם הפעלת מתח מתאים, שכבת הקוורץ - דחוקה בין שתי אלקטרודות מתכת - מתנודדת בתדר מסוים.

הוסף השעיה של שלפוחיות חד-שכבתיות קטנות - המורכבות משכבת שומנים אחת - על החיישן. השלפוחיות סופגות על המשטח ההידרופילי המצופה סיליקה - מגדילות את מסת החיישן ומקטינות באופן יחסי את תדירות התנודה שלו.

השלפוחיות המלאות במאגר פועלות כשכבה ויסקו-אלסטית, מה שמוביל לפיזור - שיכוך התנודה. השלפוחיות שנספחו נקרעות ומשחררות את המאגר הסגור. הירידה במסה כתוצאה מכך מגדילה את תדירות התנודה.

השלפוחיות הקרועות יוצרות שכבה דו-שכבתית רציפה, המחקה קרום ביולוגי. הנוקשות של הדו-שכבתי מפחיתה את הפיזור.

הוסף חיץ המכיל יוני סידן, יחד עם חלבון המטרה. יוני הסידן נקשרים לחלבון ומשנים את הקונפורמציה שלו - מה שמאפשר קשירה למולקולות השומנים בשכבה הדו-שכבתית.

קשירת חלבון מגדילה את מסת החיישן - מה שמוביל לירידה בתדירות. השלמות המבנית של הדו-שכבתי נותרת ללא פגיעה - מה שגורם רק לעלייה קלה בפיזור.

הוסף חומר כלאט כדי לקלוט את יוני הסידן - לנתק את החלבונים מהשכבה הדו-שכבתית.

היעדר חלבונים קשורים מחזיר את התדירות והפיזור של התנודה לרמות שאינן קשורות לחלבון - מה שמאשר שהקישור תלוי אך ורק בסידן ושהדו-שכבת