קוורץ-קריסטל מיקרו-איזון ביו-פנינג מבוסס ביוסנסור לחקר אינטראקציות חלבון-תרופה

כדי לחקור אינטראקציות חלבון-תרופות, התחל עם מיקרו-איזון קוורץ-גביש, QCM, שבב חיישן המורכב מחומר קרמי פיזואלקטרי המצופה בשכבת זהב דקה המשמשת כאלקטרודה.

שכבו את האלקטרודה בתמיסת תרופות בדיקה ויוצרות שכבה אחידה.

הכנס את שבב החיישן למנגנון QCM. טבלו אותו בקובטה המכילה חוצץ. הפעל שדה חשמלי, הגורם לגבישים קרמיים להתנודד בתדר קבוע בהתבסס על מסת מולקולות התרופה על שבב החיישן.

הוסף ספריית פאג'ים T7 המכילה תערובת של פאג'ים מהונדסים גנטית המציגים גרסאות פפטיד התמזגו עם חלבון הקפסיד של הפאג'ים. הפאג'ים המציגים פפטיד ספציפי נקשרים למולקולות תרופות בעלות זיקה גבוהה ומשתקעים על שבב החיישן. גלילה זו של פאג'ים T7 מגדילה את המסה על שבב החיישן, וכתוצאה מכך תנודת הגביש פוחתת עם הזמן.

לאחר שיווי משקל, העבירו את שבב החיישן הקשור לפאג' לצלחת פטרי לחה. מכסים את השבב בתמיסה חיידקית ודוגרים. פאג'ים מדביקים את החיידקים ומשתכפלים, ומייצרים פאג'ים ספציפיים המבטאים פפטידים המשתחררים בתמיסה.

שחזר את הפאג'ים הללו ונתח את רצף חומצות האמינו של הפפטידים שנבחרו על ידי זיקה לתרופה. השווה את רצף חומצות האמינו של פפטיד זה לחלבון המטרה.

האזור בעל הדמיון הגבוה מייצג את אתר האינטראקציה הפוטנציאלי בין תרופות החיוני לאינטראקציה בין תרופה-חלבון.

כדי להכין שבב חיישן QCM, חבר שבב חיישן קרמי למתנד של מכשיר QCM של 27 מגה-הרץ, ורש