בדיקה חיסונית ישירה מבוססת ספקטרוסקופיית ראמאן לזיהוי אנטיגן ספציפי

התחל בדגירה של מולקולות צבע מדווח ראמאן עם ננו-חלקיקי זהב כדי שהכתבים ייקשרו לננו-חלקיקים.

הוסף פוליאתילן גליקול, נוגדנים מצומדים ל-PEG ספציפיים לאנטיגן המטרה. הנוגדנים נצמדים באופן קוולנטי לננו-חלקיקים באמצעות קשירת זהב-דיסולפיד. הוסף PEGs מצומדים לתיול כדי לחסום את אתרי הננו-חלקיקים הנותרים ולמנוע צבירת ננו-חלקיקים, וליצור בדיקות ננו-חלקיקים.

מצפים בארות צלחת בדיקה חיסונית עם אנטיגן המטרה. חסום את אתרי הצלחות הנותרים בתמיסה המכילה חלבונים. הוסף את בדיקות הננו-חלקיקים. בצע דילול בדיקה סדרתי על פני הבארות. דגירה כדי שהנוגדנים בבדיקות ייקשרו לאנטיגנים ויוצרים קומפלקסים.

השתמש במיקרוסקופ ראמאן כדי לקבוע את התגובה האופטית של הגשושית. הלייזר המונוכרומטי הפוגע מעורר את אלקטרוני פני השטח של ננו-חלקיקי הזהב וגורם לתנודתם, ויוצר שדה אלקטרומגנטי מקומי גבוה על פני השטח.

קרן האירוע וכתבי ראמאן מתקשרים, וגורמים לאור לא אלסטי משופר או לפיזור רמאן באורכי גל ותדרים שונים עקב השדה האלקטרומגנטי המוגבר. אות הרמאן הנפלט באופן לא אלסטי משמש ליצירת ספקטרום ראמאן.

שרטט את האזור הספקטרלי של פסגת מדווח הרמאן כנגד ריכוז הגשושית כדי למצוא את הגבול התחתון של זיהוי הגשושית ולהקל על זיהוי רגיש יותר של האנטיגן.

על מנת להכין את בדיקות הראמאן, הכינו תחילה שתי קבוצות של 1.5 מיליליטר של ננו-חלקיקי זהב ואת מדווח הרמ