אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 4:00 דק׳ • July 8th, 2025
קחו למשל עכבר מורדם שתוכנן לבטא חלבון פלואורסצנטי בנויטרופילים. לגלח את הגב וליצור חתך עגול. יש להסיר את העור החתוך כדי לחשוף את הפאשיה - שכבת רקמת חיבור מתחת.
קחו מזרק המכיל תרחיף של Staphylococcus aureus - חיידק פתוגני - שעבר שינוי גנטי כדי לייצר ביולומינסנציה. הזריק את התרחיף בין הפאשיה לרקמה הבסיסית ויוצר זיהום פצע מקומי.
קולטני זיהוי הדפוסים על תאי סטרומה בפאשיה מזהים את הדפוסים המולקולריים הקשורים לפתוגן על החיידקים. קשירה זו גורמת לשחרור של ציטוקינים וכימותרפיים פרו-דלקתיים - וכתוצאה מכך דלקת.
תרופות כימותרפיות מגייסות נויטרופילים במחזור הדם באתר ההדבקה. נויטרופילים נכנסים בולעים את החיידקים לתוך פגוזום שמתמזג עם גרגירים ציטופלזמיים, וגורם לשחרור פפטיד אנטי-מיקרוביאלי.
NADPH אוקסידאז - קומפלקס אנזימים - מתאסף על קרום הפגוזום ומייצר מיני חמצן תגובתיים או ROS. הפפטידים האנטי-מיקרוביאליים וה-ROS גורמים לפירוק חיידקים.
כתגובת נגד, החיידקים מפרישים גורמי אלימות המחלחלים לקרום הנויטרופילים, וגורמים לליזה של תאים. החיידקים גם משחררים אנזימים לשקיעת פיברין כדי למנוע פגוציטוזיס.
התגובה החיסונית מובילה למורסה - כמוסת פיברין המכילה תאי חיידקים, נויטרופילים ותאים מתים.
רשום את הקרינה הנויטרופילית והביולומינסנציה החיידקית כדי לדמיין את האינטראקציה בין חיידקים לנויטרופילים.
לחיסון Staph aureus, מלאו מזרק אינסולין בגודל 28 ב-50 מיקרוליטר של החיסון החיידקי הביו-לומינסנט המוכן, והשתמשו באצבע כדי למשוך את הדרמיס של החיה הפצועה הצידה. החזיקו את המזרק כמעט במקביל לרקמה, הכניסו לאט את המזרק לרקמה עד שמורגשת ירידה פתאומית בהתנגדות, מה שמעיד על פירסינג של הפאשיה.
כשהמחט מונחת במרכז הפצע, העבירו לאט לאט את כל נפח החיסון. ודא שהחיסון יוצר בועה במרכז הפצע עם דליפה או פיזור מינימלי, והסר את המזרק באיטיות מבעל החיים. לאחר מכן, החזירו את החיה לכלוב שלה עם חום ומעקב עד להחלמה מלאה.