מיקרוסקופ תוך חיוני לניתוח אינטראקציות תאי דם-אנדותל במודל עכבר דלקתי
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
אימונולוגיה
0 צפיות • 4:45 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם עכבר מורדם שהוזרק תוך צפקי עם ליפופוליסכריד כדי לגרום לדלקת.
חתכו את הבטן כדי לחשוף את חלל הבטן. שמרו על לחות האיברים עם מי מלח. הזרקת רודמין 6G רטרו-אורביטלית. מולקולות הצבע הפלואורסצנטיות נכנסות למחזור הדם ומסמנות לויקוציטים וטסיות דם לצורך הדמיהן.
כעת, הוציא לולאה של אילאום עם כלי המזנטריה שלו. שמרו על לחות הרקמה עם מי מלח מחוממים מראש להדמיה מיטבית. תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי, התמקדו בווריד מזנטרי למיקרוסקופיה תוך-חיונית.
הזרקת הליפופוליסכריד גורמת להפעלת תאי אנדותל עם ויסות מוגבר של מולקולות הדבקה, כולל סלקטינים. טסיות דם במחזור מגויסות לאנדותל, שם הן נקשרות באמצעות אינטראקציות ספציפיות של מולקולת הדבקה-ליגנד, ויוצרות מתחמי הידבקות.
בשל אינטראקציות אלה, טסיות הדם מופעלות ומשחררות גרגירים המכילים מולקולות, כולל סרוטונין, המקדמים גיוס לויקוציטים.
לויקוציטים עוברים אל פני האנדותל ונקשרים לטסיות דם מופעלות. יתר על כן, לויקוציטים מתגלגלים לאורך האנדותל ונקשרים לתאי האנדותל באמצעות אינטראקציות דבק חלשות. תנועה מתגלגלת מפעילה אינטגרינים של לויקוציטים להדבקה איתנה לתאי אנדותל, חיוניים לגלגול לויקוציטים-אנדותל.
באמצעות מיקרוסקופיה תוך-חיונית, דמיין את הלויקוציטים והטסיות הפלואורסצנטיים כדי לקבוע את האינטראקציות שלהם בזמן אמת עם תאי אנדותל.
ארבע שעות לפני ההדמיה התוך-חיונית, הזרי
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים