הערכת היעילות של תרכובת בדיקה אנטי-ויראלית באמצעות בדיקת אינאקטיבציה ויראלית

קח שפופרות עם נגיף הפטיטיס C רקומביננטי, או תרחיף HCV המכיל RNA המקודד מדווח לוציפראז מופרש.

הוסף תרכובת בדיקה אנטי-ויראלית וממס למבחנות הבדיקה והבקרה השליליות.

תרכובות הבדיקה נקשרות לגליקופרוטאינים של HCV, ומשביתות את הנגיף.

לאחר הדגירה, יש לדלל את התערובות כדי למנוע אינטראקציות בין תאים מורכבים בשלבים הבאים.

הוסיפו את התערובות המדוללות הללו לחד-שכבות הפטומה התומכות בשכפול HCV. דגירה.

ה-HCV המומת בתרכובת אינו יכול להיצמד לקולטנים ספציפיים על פני התא, בעוד שגליקופרוטאינים פעילים של HCV נקשרים לקולטנים אלה, מה שמקל על היצמדות תאית.

הסירו HCV לא נספגים. שטפו עם חוצץ והוסיפו מדיה. דגירה למשך זמן ממושך.

ה-HCV הקשור מופנם, משחרר RNA ויראלי ומוביל לסינתזה של חלבון ויראלי ולוציפראז, המופרשים מהתא.

אספו את חומרי העל המכילים לוציפראז. צנטריפוגה ולהוסיף מצע לוציפראז לסופרנטנטים.

לוציפראז מחמצן את המצע ופולט אור.

זוהר גבוה יותר בבאר הבקרה מאשר בבדיקה מעיד על השבתת הנגיף על ידי התרכובת.

כדי להתחיל בבדיקת ההשבתה הוויראלית, ראשית, צלחת 1 כפול 10 עד תאים רביעיים לבאר בצלחת של 96 בארות. דגרו על התאים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם 5% פחמן דו חמצני למשך הלילה לצורך היצמדות. לזיהום, הכינו נגיף הפטיטיס C או חלקיקי HCV המתויגים על ידי מדווח Gaussia luciferase, כפי שמוזכר בפרוטוקול הטקסט.

בשפופרת סטרי