Name: לייזר Microdissection לכידה של רקמות היונקים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 34 s
Description: למדו מיקרודיסקציה בלייזר לבידוד רקמות מדויק מדגימות ביולוגיות. שיטה זו מאפשרת ניתוח תאים ספציפיים במחקרי עצבים ומיקרוסקופיה מתקדמת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

למחברים אין ניגודי אינטרסים להצהיר עליהם.

לייזר microdissection לכידה של רקמות היונקים

Laser Capture Microdissection of Mammalian Tissue

מיקרוסקופיה לייזר ללכוד, הידוע גם בשם microdissection לייזר (LMD), מאפשר למשתמש לבודד מספר קטן של תאים או רקמות מן קפוא או פורמלין-קבוע, פרפין, מוטבע סעיפים רקמות. טכניקות LMD להסתמך על קרום תרמו יציב או להציב מעל או מתחת, בסעיף רקמות. בשיטה אחת, אנרגיית לייזר ממוקדת משמש כדי להמיס את הממברנה אל התאים הבסיסית, אשר לאחר מכן ניתן הרים מתוך קטע הרקמה. בכל זאת, אנרגיית הלייזר מאדה את נייר הכסף לאורך שביל &quot;נמשך&quot; על הרקמה, דבר המאפשר את התאים שנבחרו ליפול לתוך המכשיר אוסף. כל טכניקה המאפשרת את בחירת התאים עם רזולוציה מינימלית של כמה מיקרונים. DNA, RNA, חלבון, שומנים דגימות יכול להיות מבודד מ ניתח מיקרו ניתח דגימות. בסרטון הזה, אנחנו מדגימים את השימוש של לייקה AS-LMD מכשיר לייזר microdissection בשבעה מגזרים, כולל היכרות עם עקרונות של LMD, מאתחל את המכשיר לשימוש, שיקולים כלליים להכנת המדגם, מקבע את הדגימה והקמת צינורות ללכוד , יישור מיקרוסקופ, התאמת שולטת ללכוד, לכידת דגימות רקמה. לייזר ללכוד מיקרו לנתיחה מאפשר לחוקר לבודד דגימות של אוכלוסיות תאים טהור קטן כמו תא ושווי כמה. זה מאפשר ניתוח של תאים של עניין, כי הם ללא מזהמים השכנות, אשר עשוי לבלבל תוצאות הניסוי.

לייזר Microdissection לכידה של רקמות היונקים

מיקרוסקופיית לכידה בלייזר, הידועה גם כמיקרודיסקציה בלייזר (LMD), מאפשרת למשתמש לבודד מספרים קטנים של תאים או רקמות מדגימות קפואות או...

שלום, שמי רוב אדוארדס. אני מנהל מתקן מיקרוסקופיית ה-Laser Capture של אוניברסיטת קליפורניה אירביין. אני אדגים בפניכם את השימוש במיקרוסקופ ה-laser capture שנמצא כאן.המכשיר שלנו הוא Leica A-S-L-M-D, שרכשנו לפני כשלוש שנים. קיימים שני סוגים שונים של מערכות לכידה בלייזר (laser capture). ניתן לדמות את אחת מהן למכונת ריתוך נקודתי, שבה נמצאת פיסת רקמה על עלית זכוכית מעל ממברנת פלסטיק המכסה את הרקמה.לאחר מכן משתמשים במקור לייזר כדי להמיס את הממברנה, ובפועל לבצע ריתוך נקודתי של הרקמה על הממברנה, ולאחר מכן מסירים את הממברנה, יחד עם הרקמה שנלכדה. אוקיי. כדי להפעיל את מערכת ה-LCM, אנו מדליקים מספר מכשירים ברצף כאן. נתחיל עם קופסת הבקרה של ה-A-S-L-M-D, שמופעלת כאן.לאחר מכן נדליק את המחשב בצורה פשוטה. אם יש לכם דגימה הדורשת אופטיקת פלואורסצנציה לצורך זיהוי התאים שיועברו ללכידה, עליכם להדליק את מנורת הכספית להארת הפלואורסצנציה. לא נשתמש בכך בהדגמה זו.אם ברצונך ללכוד תמונות באיכות גבוהה של הדגימות לפני ואחרי, ניתן להדליק את מצלמת ה-spot בנפרד כאן, לאחר הדלקת תיבת הלוגיקה והמחשב; לאחר מכן מדליקים את יחידת בקרת הספק של הלייזר כאן, אשר מופעלת באמצעות מפתח בחלקו האחורי התחתון של המכשיר. ולבסוף, מדליקים את מסך המחשב. על המסך מופיעים מספר בקרים שיהיה עליך להכיר.תשתמשו בהם באופן סדיר למדי. זוהי תוכנה קלאס

laser-capture-microdissection-of-mammalian-tissue

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

הסרטון מתאר את נתיחת הלייזר של מודל התרבות המשותפת האורגנוטיפית התלת-ממדית ברמת המיקרון. במודלים אורגנוטיפיים תלת-ממדיים, מרכיבי סטרומה כגון פיברובלסטים מתורבתים בתרבית תלת-ממדית עם תאי אפיתל סרטניים. המודל התלת-ממדי משמש ככלי ניסיוני המאפשר לחקור פלישה ואינטראקציות סרטן-סטרומה בתנאים כמעט פיזיולוגיים.

מיקרודיסקציה בלייזר: טכניקה לבידוד תאי סרטן מעי גס פולשים ממודל תרבית אורגנוטיפית תלת-ממדית

Microdissection כבר מועסק באופן נרחב לבדיקה של DNA, RNA וחלבונים בתוך רקמה. לייזר מיקרוסקופית הלכידה (LCM) הוא השיטה הנפוצה ביותר, אך טכניקה חדשה כרסום, mesodissection, זמינה לאחרונה. אנו מדגימים מיצוי RNA מפרפין פורמלין mesodissected הקבוע שקופיות רקמות גלומות של גרנולומות חפת Mycobacterium.

גישה החדשנית Microdissection לשחזור<em&gt; חפת Mycobacterium</em&gt; תמלילים ספציפיים מפרפין קבוע פורמלין משובץ ריאות גרנולומות

הבידוד של נוירונים דופמין הבודדים או אזור tegmental הגחון עם אימונוהיסטוכימיה ישירה או עקיפה מודגם באמצעות microdissection ללכוד לייזר. פרמטרים לבידודה של רקמה משקופיות זכוכית באמצעות לייזר אינפרא אדום ומשקופיות קרום באמצעות השילוב של לייזר אינפרא אדום ואולטרא-סגול הם דנו.

Microdissection לכידת לייזר - הפגנה של הבידוד של פרט דופמין נוירונים ופינת הגחון tegmental השלם

מטרת פרוטוקול זה היא להשתמש במיקרו-דיסקציה של לכידת לייזר כשיטה יעילה לבידוד אוכלוסיות טהורות של סוגי תאים מרקמות ערמונית הטרוגניות לצורך ניתוח RNA במורד הזרם.

Microdissection לייזר לכידתו של אדם הערמונית האפיתל לניתוח RNA

כאן, אנו מתארים את פרוטוקול עבור microdissection לכידה לייזר לשחזור (LCM) לבידוד meshwork trabecular (TM) לניתוח RNA במורד הזרם. היכולת לנתח שינויים בביטוי הגנים ב ה-TM יעזור להבין את המנגנונים המולקולריים שבבסיס של מחלות עינית הקשורות TM.

לייזר Microdissection לכידה של מאוד טהור Meshwork Trabecular מעיני העכבר עבור ניתוח ביטוי גנטי

פרוטוקול לכידת מיקרודיסקציה (LCM) לכידה פותחה כדי להשיג כמות מספקת של RNA באיכות גבוהה עבור ניתוח ביטוי גנים בתאי עצם. המחקר הנוכחי מתמקד על מקטעי עצם הירך העכבר. עם זאת, פרוטוקול LCM דווח כאן ניתן להשתמש כדי ללמוד ביטוי גנים בתאים של כל רקמה קשה.

לכידת לייזר פרוטוקול מיקרודיסקציה התשואות באיכות גבוהה RNA מ-העכבר קפואים טרי-קפוא

פרוטוקול זה מתאר מיקרוניתוח לכידת לייזר עבור הבידוד של סחוס ועצם מחלקים קפואים טריים של העובר העכבר. סחוס ועצם יכול להיות דמיינו במהירות על ידי cresyl סגול כתמים ונאסף בדיוק כדי להניב RNA באיכות גבוהה עבור ניתוח transcript.

לכידת לייזר מיקרו חיתוך של העכבר סחוס ועצם עבור ניתוח ביטוי גנים

לייזר לחיתוך מיקרו (LMD) היא טכניקה רגישה ומאוד לגילוי שניתן להשתמש בה כדי לחשוף מסלולים כי בתווך glioma טרוגניות ופלישה. כאן, אנו מתארים פרוטוקול ממוטב כדי לבודד אזורים נפרדים מרקמת glioma באמצעות LMD לייזר ואחריו ניתוח טרנססקריפט.

לכידת לייזר מיקרודיסקציה של גלימה Subregions עבור אפיון מרחבית ומולקולרית של טרוגניות Intrאטומוראלי, הנחלים, ופלישה

מתואר פרוטוקול המשתמש במיקרו-דיסקציה של לייזר כדי לבודד רקמות נמטודה בודדות לריצוף RNA. הפרוטוקול אינו דורש ערכות כלים גנטיות ספציפיות למינים, מה שמאפשר להשוות פרופילי ביטוי גנים בין מינים שונים ברמה של דגימות של רקמה אחת.

מיקרו-דיסקציה של לייזר עבור יישומים של רקמה אחת אגנוסטית של מינים

פרוטוקול זה מתאר זרימת עבודה בתפוקה גבוהה לסגמנטציה מונחית בינה מלאכותית של אזורי עניין שאושרו על-ידי פתולוגיה מתמונות מוכתמות ודקות של מקטעי רקמה להעשרת אוכלוסיות תאים שנפתרו על-ידי היסטולוגיה באמצעות מיקרו-דיסקציה של לייזר. אסטרטגיה זו כוללת אלגוריתם חדשני המאפשר העברת תיחום המציין אוכלוסיות תאים בעלי עניין ישירות למיקרוסקופי לייזר.

מיקרו-דיסקציה מתועשת, מונחית בינה מלאכותית בלייזר לניתוח פרוטאומי בקנה מידה זעיר של המיקרו-סביבה של הגידול

פרוטוקול זה מתאר שיטה לבידוד RNA מאזורים היסטולוגיים מוגדרים של רקמת כבד עכבר, המוטמעת בטמפרטורת חיתוך אופטימלית בטמפרטורת חיתוך אופטימלית באמצעות מיקרודיסקציה ללכידת לייזר, המאפשרת ניתוח ביטוי גנים ממוקד במורד הזרם.

מיקרודיסקציה בלייזר של רקמת כבד עכבר מקובעת בפרפורמלדהיד לניתוח RNA

למדו מיקרודיסקציה בלייזר לבידוד רקמות מדויק מדגימות ביולוגיות. שיטה זו מאפשרת ניתוח תאים ספציפיים במחקרי עצבים ומיקרוסקופיה מתקדמת.

לייזר Microdissection לכידה של רקמות היונקים

גלה סרטונים נוספים