Name: טכניקה שונה לקשירת עורקים הכליליים בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-29T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: למד טכניקה כירורגית ליצירת אוטם שריר הלב בעכברים באמצעות קשירת עורק לב anterior descending. שיטה זו מאפשרת חקר תפקוד לבבי ומנגנוני מחלות לב בדגם בעלי חיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. טקסט פרוטוקול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני שיעבור לניתוח, להרדים עכבר זכר (C57BL / 6) שהוא 6 שבועות ומעלה על ידי שאיפה של 2-5% isoflurane. בצע קמצוץ בוהן כדי לאשר שהחיה היא מספיק מורדמת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העכבר המודע מונח על הגב שלה על משטח חם כדי לשמור על טמפרטורה קבועה של 37 מעלות צלזיוס חזה precordial בצד שמאלו מגולח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אבטח את העכבר למכשיר אינטובציה עם קאמרי isoflurane מלא. הכנס צינור בקוטר פנימי 0.2 לתוך קנה הנשימה של העכבר דרך פה, לאחר מכן הנח את עכבר המונשם באזור ניתוח aseptic (37 ° C על ידי בקר טמפרטורה) ולחבר את צינור endotracheal להנשמה (קצב של 120 לדקה, בלחץ של 4-6 mmH 2 O); לחטא את האזור עם פולידין ו75% אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל משחת עיניים לעיניו של העכבר. אלקטרודות לא.ק.ג. הרגיל על הכפות ולחבר את העכבר למקליט אק&quot;ג. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במספריים סטריליות לעשות חתך סנטימטרים 1.5 לאורך קו אמצע בית השחי. מספריים משמשים במקום באזמל כדי להימנע מפגיעה ברקמה שמתחתיו בעכברים. ואז, להשתמש במספריים קהה כולים-עצה כדי לנתח ולחזור בו שריר precordial מקיר החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבצע פתיחת בית חזה שמאלית בין הצלעות השלישיות והרביעיות כדי להמחיש את המשטח הקדמי של הלב והריאה השמאלית </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בהמשך חזר בי קיר בית החזה באמצעות מפשק הולם, על מנת לשפר את ההדמיה ונגישות. הסר את קרום הלב באמצעות מלקחי שיניים ומספריים קהים בקצוות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקשור את העורק הכלל השמאלי על ידי הצבת המחט (מצורף עם תפר 7-0 ethilon) מתחת לעורק עם להקה של שריר לב בין המייתר והעורק. חסימה מוצלחת של עורקים הכליליים מאומתת על ידי hypokinesis / akinesis של קיר החדר השמאלי הקדמי ועל ידי השינויים של הקלטת א.ק.ג. (למשל גובה ST פלח, QRS broadening) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את החזה על ידי צבת שני תפרים (6-0 תפר ethilon) בצלעות השלישיות ורביעיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש תפר ethilon 5-0 כדי לסגור את העור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשיכוך כאבים שלאחר ניתוח, להזריק לintraperitoneal יחיד של עצירות (0.05 מ&quot;ג / ק&quot;ג). בעלי החיים באופן ספונטני להתאושש בתוך 2-5 דקות לאחר הפסקת הרדמת isoflurane. לבסוף, מקם את העכבר בכלוב חם ולספק 0.6 מ&quot;ג / מיליליטר העצירות בשתיית המים (כיסוי טקסט: 0.6 מ&quot;ג / מ&quot;ל ​​במי שתייה) למניעת מצוקה שלאחר הניתוח. לעקוב מקרוב אחר העכבר במשך 24 השעות הראשונות שלאחר ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אקו מבוצע כדי להעריך את תפקוד לב 3 ימים לאחר אוטם שריר לב. הליך מוצלח מאומת על ידי אקינזיה בקיר החדר השמאלי הקדמי (ראה וידאו המצורף בתוצאות). בתום הניסוי, הלב ייאסף ויאוחסן ב- 80oC לחקירות נוספות. ביטוי גנים, כלומר. </li></ol>

<ol><li>Tabrizchi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-blocker+therapy+after+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev.+Cardiovasc.+Ther%22%5BJournal%5D)">Beta-blocker therapy after acute myocardial infarction.</a> Expert Rev. Cardiovasc. Ther. 11, 293-296 (2013).</li>
<li>Pell, S., Fayerweather, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+in+the+incidence+of+myocardial+infarction+and+in+associated+mortality+and+morbidity+in+a+large+employed+population%2C+1957-1983%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Trends in the incidence of myocardial infarction and in associated mortality and morbidity in a large employed population, 1957-1983.</a> N. Engl. J. Med. 312, 1005-1011 (1985).</li>
<li>Ramunddal, T., Gizurarson, S., Lorentzon, M., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiarrhythmic+effects+of+growth+hormone--in+vivo+evidence+from+small-animal+models+of+acute+myocardial+infarction+and+invasive+electrophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Electrocardiol%22%5BJournal%5D)">Antiarrhythmic effects of growth hormone--in vivo evidence from small-animal models of acute myocardial infarction and invasive electrophysiology.</a> J. Electrocardiol. 41, 144-151 (2008).</li>
<li>Thom, T., Haase, N., Rosamond, W., Howard, V. J., Rumsfeld, J., Manolio, T., Zheng, Z. J., Flegal, K., O'Donnell, C., Kittner, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2006+update%3A+A+report+from+the+american+heart+association+statistics+committee+and+stroke+statistics+subcommittee%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2006 update: A report from the american heart association statistics committee and stroke statistics subcommittee.</a> Circulation. 113, 85-151 (2006).</li>
<li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse%3A+A+comparison+with+coronary+artery+ligation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 289, 1291-1300 (2005).</li>
<li>Omerovic, E., Ramunddal, T., Lorentzon, M., Nordlander, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+neuropeptide+y2+receptor+blockade+on+ventricular+arrhythmias+in+rats+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of neuropeptide y2 receptor blockade on ventricular arrhythmias in rats with acute myocardial infarction.</a> Eur. J. Pharmacol. 565, 138-143 (2007).</li>
<li>Ahn, D., Cheng, L., Moon, C., Spurgeon, H., Lakatta, E. G., Talan, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+myocardial+infarcts+of+a+predictable+size+and+location+by+branch+pattern+probability-assisted+coronary+ligation+in+c57bl%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Induction of myocardial infarcts of a predictable size and location by branch pattern probability-assisted coronary ligation in c57bl/6 mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 286, 1201-1207 (2004).</li>
<li>Lindbom, M., Ramunddal, T., Camejo, G., Waagstein, F., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+effects+of+myocardial+creatine+depletion+on+left+ventricular+function+morphology+and+lipid+metabolism%3A+Study+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Card+Fail%22%5BJournal%5D)">In vivo effects of myocardial creatine depletion on left ventricular function morphology and lipid metabolism: Study in a mouse model.</a> J. Card Fail. 14, 161-166 (2008).</li>
<li>Omerovic, E., Bollano, E., Basetti, M., Kujacic, V., Waagstein, L., Hjalmarson, A., Waagstein, F., Soussi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioenergetic%2C+functional+and+morphological+consequences+of+postinfarct+cardiac+remodeling+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mol.+Cell.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Bioenergetic, functional and morphological consequences of postinfarct cardiac remodeling in the rat.</a> J. Mol. Cell. Cardiol. 31, 1685-1695 (1999).</li>
<li>Gao, E., Lei, Y. H., Shang, X., Huang, Z. M., Zuo, L., Boucher, M., Fan, Q., Chuprun, J. K., Ma, X. L., Koch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circ. Res. 107, 1445-1453 (2010).</li>
</ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

ההליך כירורגי לרע&quot;א קשירה כפי שמודגם בדוח זה הוא שיטה אמינה ולשעתק לאינדוקציה של MI ניסוי בעכברים 3, 6. הקשירה של רע&quot;א על פי פרוטוקול זה גורמת איסכמיה לבבית עוסקת בדרך כלל ~ 40% מחדר השמאלי 3. זה גורם לשינויים משמעותיים במגזר א.ק.ג. ST 7 וחיוורון גלוי על פני השטח הקדמיים של הלב. בשל אוטם שריר הלב הגדול, התמותה יכולה להיות עד 30% 8, 9. הערה צריכה להיעשות שאזור ולאחר אוטם שריר הלב infarcted תמותה עשויה להיות שונה בין זני בעלי חיי...

טכניקה שונה לקשירת עורקים הכליליים בעכברים

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

אוטם שריר הלב (MI) הוא אחד מהגורמים החשובים ביותר של תמותה בבני האדם 1-3. על מנת לשפר את התחלואה ותמותה בחולים עם אוטם לבבי שאנחנו צריכים ידע טוב יותר לגבי הפתופיזיולוגיה של שריר לב. ידע זה עשוי להיות בעל ערך להגדרת מטרות טיפוליות חדשות לטיפולים חדשניים לב וכלי דם 4. דגם MI ניסויי בעכברים הוא מודל של חיות קטנות יותר ויותר פופולרי במחקר קליני שבאוטם מושרה באמצעות קשירה קבועה או זמנית של עורק הכלל השמאלי (רע&quot;א) 5. בסרטון הזה, אנו מתארים את שיטת צעד אחר צעד כיצד לגרום לאוטם ניסוי בעכברים. בעלי החיים הם קודם הרדימו עם 2% isoflurane. אז העכבר לא מודע, מחובר לצינורות ומחוברים למכונת נשמה להנשמה מלאכותית. החזה השמאלי מגולח וחתך 1.5 סנטימטר לאורך קו אמצע בית השחי נעשה בעור. השרירים העיקריים הוא שמאל pectoralis בוטות dissociated עד הצלעות חשופות. שכבות השריר משך צידה וקבועה עם עפעף-מפשק. לאחר הכנות אלה, פתיחת בית החזה שמאלית מתבצעת בין הצלעות השלישיות והרביעיות כדי להמחיש את המשטח הקדמי של הלב והריאה שמאלית. הקטע הפרוקסימלי של עורק רע&quot;א אז גבעול עם תפר 7-0 ethilon אשר בדרך כלל גורם לגודל אוטם ~ 40% מחדר השמאלי. בסוף, החזה סגור ובעלי החיים מקבלים שיכוך כאבים לאחר ניתוח (Temgesic, 0.3 mg/50 מ&quot;ל, IP). אותם מחזיקים בעלי החיים בכלוב חם עד להחלמה ספונטנית.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מכשיר </td><td> תיאור פונקציה </td></tr><tr><td> מספריים קהים קצה </td><td> משמש לחיתוך עור, שריר חזה בין צלעות, ותפרים </td></tr><tr><td> מפשק עין </td><td> לחשיפת נוף כירורגית </td></tr><tr><td> מלקחיים קהים קצה </td><td> נהג לתפוס עור ושרירים </td></tr><tr><td> בעל מחט </td><td> להחזיק מחט </td></tr><tr><td> 5-0 תפר </td><td> נהג לתפור עור </td></tr><tr><td> 6-0 תפר </td><td> נהג לתפור שריר חזה </td></tr><tr><td> 7-0 תפר </td><td> נהג ...

ההליך הניתוחי המשמש ללגרום לאוטם שריר לב בעכברי ניסוי מתחיל בבית חזה שמאלי בין השלישי ואת צלעות 4 כדי להמחיש את המשטח הקדמי של הלב והריאה שמאלית. העורק הכלל שמאלי גבעול, החזה סגור והעכבר מותר להתאושש באופן ספונטני.

אוטם בשריר הלב (Myocardial infarction - MI) הוא אחת הסיבות החשובות ביותר לתמותה בבני אדם1-3. כדי לשפר את שיעורי התחלואה והתמותה במטופלים עם MI...

המטרה הכללית של הליך זה היא להשרות אוטם שריר הלב בעכברים. הדבר מבוצע תחילה על ידי ביצוע חתך בעור לאורך הקו הבטלי המרכזי. לאחר מכן, החשופ השריר הלב נחשף באמצעות תורקוטומיה שמאלית בין הצלע השלישית לרביעית.לאחר מכן מבצעים ליגציה במקטע הפרוקסימלי של העורק הכלילי השמאלי היורד (left anterior descending artery). לבסוף, סוגרים את בית החזה ומחזירים את העכבר לכלוב להחלמה ספונטנית. בסופו של דבר, ניתן לבחון את האוטם השרירי של שריר הלב באמצעות אלקטרוקרדיוגרפיה או אקו-קרדיוגרפיה.הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית, כיוון שליגציה של העורק הכלילי בקרבה לצד שמאל היא קשה ללמידה. השגת אוטם שריר לב Adequate מובטחת על ידי מיקום הליגציה ממש מתחת לפיה של הצד שמאל. עם זאת, חשוב לא לנקב את ה-left AUM, שכן הדבר עלול לגרום לדימום קטלני.כדי להתחיל בניתוח, הרדימו עכבר בן שישה שבועות ומעלה על ידי שאיפה של 2% עד 5% פלואור. בצעו צביטה בבוהן כדי לוודא שהחיה מורדמת מספיק. לאחר שהעכבר שקע בטרנסדרציה מלאה, העבירו אותו לאזור הניתוח והניחו אותו על.החזירו את העכבר על פד מחומם. כדי לשמור על טמפרטורה קבועה של 37 °C, חברו את העכבר למכשיר אינטובציה עם תא שדה של isoflurane באמצעות צינורית בקוטר 0.2 cm ותערובת של 2% isoflurane באוויר. הכניסו את הצינור לקנה הנשימה (trachea) של העכבר.גלחו את אזור החזה הפרקורדיאלי בצד שמאל, ולאחר

modified-technique-for-coronary-artery-ligation-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

וידאו זה מדגים כיצד להשתמש במודל מהיר ואמין ללמוד תהליכים pathobiological ו pathophysiological של שריר הלב.

LAD-קשירת: מודל Murine של אוטם שריר הלב

מניפולציות גנטיות רבות ו / או זריקות intramyocardial של גנים, חלבונים, תאים, ו / או biomaterials באים על גבי מימד הזמן במחקרים של פגיעה איסכמיה / reperfusion חריפה שיפוץ כרונית בעכברים. וידאו זה ממחיש את הליכי microsurgical עבור איסכמיה / reperfusion, קשירת עורק כלילי קבע, ומחקרים הזרקת intramyocardial.

קשירת עורקים כלילית לבין הזרקת Intramyocardial ב מודל Murine של אוטם

בסרטון זה, אנו מתארים הליך כירורגי ליצירת מודל עכבר של אוטם שריר הלב על ידי קשירת העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי.

יצירת מודל מורין של אוטם שריר הלב: הליך כירורגי לקשירה קבועה של עורק כלילי יורד קדמי שמאלי במודל עכבר

אנחנו מציגים את שיטה כירורגית כדי לגרום לאיסכמיה / reperfusion הניסיוני (I / R) פציעה כדי לדמות אוטם שריר הלב (MI) בעכברי מודל, המאפשר ליותר בהירות במיצוב של קשירה בעורק השמאלי הקדמי יורד (LAD) כדי להגדיל את שחזור ניסויים MI בעכברים.

דגם של שריר הלב איסכמיה reperfusion הפגיעה Murine באמצעות קשירת של העורק השמאלי קדמי יורד

מתואר מודל בעל יכולת שחזור גבוהה לאוטם שריר הלב בעכברים עם מניפולציות פולשניות מינימליות. ניתן לבצע את המודל בקלות, וכתוצאה מכך יכולת שחזור ושיעור הישרדות גבוהים. לפיכך, המודל המתואר יפחית את מספר בעלי החיים הנדרשים כמתבקש על ידי עקרון 3R (החלפה, עידון והפחתה).

נוהל כירורגי זעיר פולשנית של גרימת אוטם שריר הלב בעכברים

אי ספיקת לב היא הגורם המוביל לאשפוז וגורם עיקרי לתמותה. מודל של קשירה קבועה של העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי בעכברים מיושם כדי לחקור עיצוב מחדש של החדרים ותפקוד לקוי של הלב לאחר אוטם שריר הלב. מוצגת הטכניקה של מדידות המודינמיות פולשניות בעכברים.

קשירת קבע של העורק השמאלי קדמי יורד כלילית בעכברים: דגם של Remodelling אוטם שריר לב ופוסט-אי ספיקת לב

אנו מספקים שיטה אמינה לקשירת העורק היורד הקדמי השמאלי (LAD) במודל עכבר. שיטה זו פחות פולשנית יחסית משיטות אחרות, הכוללת אינטובציה אנדוטרכיאלית, גישת כריתת בית החזה בצד שמאל וניתוח בית החזה. שיטה זו יכולה לשמש כמודל לאוטם שריר הלב החריף והכרוני (MI).

Murine שמאל Anterior יורד (LAD) קשירת עורקים הכליליים: דגם משופר או פשוט עבור אוטם שריר לב

כאן אנו מתארים הליך כירורגי המראה כיצד להשיג הארכה קבועה של עורק שמאלי הקדמי כלילית בעכברים. מודל זה הוא בעל רלוונטיות גבוהה לחקור את הפתופסולוגיה של אוטם שריר הלב ואת התהליכים הביולוגיים המקביל.

מודל אוטם שריר הלב באמצעות הארכה קבועה של עורק שמאלי קדמי כלילי יורד

תחת הרדמה מספקת, לב העכבר הוחצן דרך החלל הבין-קוסטלי, ואוטם שריר הלב נגרם בהצלחה על ידי קשירת העורק היורד הקדמי השמאלי (LAD) באמצעות חומרים הזמינים ברוב המעבדות.

שיטה פשוטה שונה להשראת אוטם שריר הלב בעכברים

כאן אנו מתארים שיטה פשוטה וניתנת לשחזור שיכולה לגרום לאוטם שריר הלב או לפגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים על ידי קשירה מדויקת של העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי באמצעות מיקרומניפולציה.

השראת אוטם שריר הלב ופגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים

מוצג כאן הליך כירורגי לקשירה קבועה של העורק הכלילי השמאלי בעכברים. מודל זה יכול לשמש כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה ואת התגובה הדלקתית הקשורים לאחר אוטם שריר הלב.

קשירת עורקים כליליים שמאליים: מודל מורין כירורגי של אוטם שריר הלב

למד טכניקה כירורגית ליצירת אוטם שריר הלב בעכברים באמצעות קשירת עורק לב anterior descending. שיטה זו מאפשרת חקר תפקוד לבבי ומנגנוני מחלות לב בדגם בעלי חיים.

טכניקה שונה לקשירת עורקים הכליליים בעכברים

גלה סרטונים נוספים