גידול נוירונים מעוררים פלואורסצנטיים ממוחו של גור עכבר מהונדס

קחו למשל מוח של גור עכבר טרנסגני.

הסר את המוח הקטן ונתח את המוח. הפרד את רקמת הקורטיקו-היפוקמפוס המכילה נוירונים מעוררים המבטאים חלבון פלואורסצנטי.

העבירו את הרקמה לצלחת תרבית המכילה חיץ.

טוחנים את הרקמה ומעבירים אותה לצינור המכיל פפאין.

פפאין מעכל את המטריצה החוץ-תאית של הרקמה, ומשחרר תאים, כולל נוירונים.

מעבירים את הרקמה המעוכלת לצינור עם חלבוני BSA, עוצרים את הפעילות האנזימטית ומונעים נזק לתאים.

לנתק את הרקמות באופן מכני ולשחרר תאים.

צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט המכיל פסולת ואנזימים.

השעו מחדש את התאים במדיה עצבית פלואורסצנטית נמוכה וסננו דרך מסננת תאים, והסירו אגרגטים של תאים.

בצע מיון תאים המופעל על ידי פלואורסצנטיות כדי לזהות ולמיין את הנוירונים הפלואורסצנטיים.

העבירו את הנוירונים הממוינים לצינור מיקרו-צנטריפוגה ולצנטריפוגה. השעיית נוירונים במדיה עצבית.

נוירונים זרעים על כיסויים מצופים פולי-L-ליזין בצלחת מרובת בארות. נוירונים נצמדים למשטחים המצופים.

הוסף מדיה עצבית. דגירה כדי להקל על צמיחה עצבית.

ראשית, נתחו את המוח הקטן והפרידו בין שתי ההמיספרות. לאחר מכן, הפרד בזהירות את ההיפוקמפוס וקליפת המוח מכל חצי כדור. העבירו את הרקמה המנותחת לצלחת פטרי בגודל 35 מילימטר המכילה מאגר תרבית תאים מקורר.

לאחר מכן, העבירו את ההיפוקמפוס וקליפת המוח המנותחים למכסה של צלחת פטרי נוספת בגודל 35 מי