בידוד תאי מיקרוגליה מקליפת המוח של מוח עכבר בוגר

קחו למשל קליפת מוח של עכבר שזה עתה נקטף.

קוצצים את הרקמה לשברים קטנים. העבירו אותם להומוגנייזר צונן המכיל מאגר עם מעכבי RNase ו-DNases.

הומוגניזציה אופטימלית של הרקמה כדי לשחרר תאים לתרחיף, תוך שמירה סלקטיבית על מיקרוגליה בשל יכולתם לעמוד בכוחות גזירה ולשמור על כדאיות הממברנה, תוך סילוק נוירונים ותאי גליה אחרים.

יתר על כן, מעכבי RNase מפרקים RNases, בעוד ש-DNases מפרקים כל DNA מזהם.

העבירו את תרחיף התאים דרך מסננת תאים כדי להסיר פסולת רקמות.

העבר את מתלה התא לצינור. צנטריפוגה והסר את האנזימים המכילים סופרנטנט. השעו מחדש את התאים במאגר.

הוסף מיקרו-חרוזים מגנטיים נגד מיאלין. מיקרו-חרוזים אלה מכוונים לחלבון המיאלין, קושרים פסולת מיאלין ואוליגודנדרוציטים.

טען את תערובת חרוזי התא לעמודת דלדול הכוללת מטריצה עם כדורים פרומגנטיים.

תחת השדה המגנטי המופעל, פסולת המיאלין והאוליגודנדרוציטים הקשורים למיקרו-חרוזים נשמרים בתוך העמודה, בעוד שתאי מיקרוגליה עוברים דרכה.

שטפו את העמוד עם חיץ ואספו את הזרימה המכילה מיקרוגליה.

ראשית, השתמשו בסכין גילוח כדי לחתוך כל אזור במוח לחתיכות עדינות שגודלן פחות ממילימטר מעוקב אחד. בעזרת פיפטה של 1 מיליליטר כשהקצה מנותק, העבירו את חתיכות הרקמה להומוגנייזרים של Dounce מקוררים מראש. הומוגניזציה של הרקמה על ידי סיבוב איטי של הבוכנה פנימה והחוצה מההומוגנייזר של Dounc