טכניקה פשוטה לבידוד ותרבית אסטרוציטים מורינים

חותכים קליפת עכבר לחתיכות קטנות ומעבירים למדיום חיתוך קר המכיל תמיסת מלח חוצצת.

הוסף אנזימי עיכול כדי לנתק את המטריצה החוץ-תאית.

כדי להסיר שאריות אנזימים, יש לשטוף עם מדיום החיתוך הקר.

החלף מדיום זה במדיום העשרת אסטרוציטים.

לאחר מכן, השתמש בפיפטה כדי לנתק את חלקי הרקמה.

העבירו את התרחיף דרך מסננת כדי להסיר רקמה לא מנותקת ולקבל תאים בודדים.

העבירו את התאים לצלחת מצופה פולימר טעונה חיובית. דגירה עם טלטול.

אסטרוציטים נצמדים בחוזקה, בעוד שהנוירונים הקשורים באופן רופף, מיקרוגליה ואוליגודנדרוציטים מתנתקים.

מדיום ההעשרה ממיר אסטרוציטים בוגרים לאסטרוציטים מצולעים מתחלקים.

הסר את התאים המנותקים ושטוף אסטרוציטים עם מאגר פוספט.

הוסיפו אנזימי עיכול כדי לנתק אסטרוציטים.

הוסף סרום המכיל מדיום כדי לעצור את הפעילות האנזימטית. אוספים את האסטרוציטים בצינור ובצנטריפוגה.

השליכו את הסופרנטנט. השעיית תאים בתווך התבגרות אסטרוציטים כדי לקדם מבנה אסטרוציטים בוגר טיפוסי בצורת כוכב.

חותכים כל רקמה קליפת המוח שתשמש ליצירת אסטרוציטים לחתיכות שגודלן אינו עולה על מילימטר מעוקב אחד. לאחר איסוף כל חלקי הרקמה, המתן עד שהם יתייצבו בתחתית הצינור. לאחר מכן, שאפו כמה שיותר מדיום. לאחר מכן, הוסיפו 2 עד 3 מיליליטר של 0.05% טריפסין EDTA, ודגרו את הדגימות באמבט מים של 37 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות.

לאחר מכן, שאפו בזהירות את