אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:33 דק׳ • July 8th, 2025
קחו תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם או hiPSCs, המבטאים יתר על המידה נוירוגנין-2, המונעים על ידי המערכת האנטיביוטית המעוררת דוקסיציקלין.
העבירו אותם לאזורי האלקטרודות האקטיביות המצופות חלבון הדבקה בבארות של מערך מיקרואלקטרודות מרובות בארות.
אפשרו ל-hiPSCs להתחבר לאזורי האלקטרודות הפעילות המצופות.
הוסף מדיה בתוספת דוקסיציקלין, הגורם לביטוי יתר של נוירוגנין-2, גורם שעתוק ספציפי לעצבים.
נוירוגנין-2 מפעיל מסלולים מולקולריים, ומוביל להתמיינות hiPSC לתאי קודמן עצביים, בעוד שמרכיבי המדיה מסייעים להישרדות התאים.
הכניסו אסטרוציטים לבארות מערך המיקרו-אלקטרודות, שם הם נצמדים לאזור הפעיל של האלקטרודה.
החלף את המדיה במדיה נוירובזלית המכילה גורמי גדילה נוירוגניים, דוקסיציקלין ומעכב צמיחת תאים.
המעכב מונע התפשטות אסטרוציטים ומבטל hiPSCs לא מובחנים.
עם הזמן, ביטוי מתמשך של נוירוגנין-2 וגורמי גדילה מניעים התמיינות תאי מבשר עצביים לנוירונים.
יתר על כן, החלף את המדיה במדיה נוירו-בזאלית המכילה סרום להישרדות אסטרוציטים.
אסטרוציטים מפרישים גורמי גדילה המקדמים התבגרות נוירונים והיווצרות סינפסות, ויוצרים רשת עצבית.
עבור MEAs עם שש בארות, יש לדלל את התאים כדי לקבל תרחיף תאים של 7.5 x 105 תאים למיליליטר. שאפו את הלמינין המדולל משש הבארות MEAs. עבור MEAs של שש בארות, צלחת התאים על ידי הוספת 100 מ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים