בידוד ותרבית של נוירונים ראשוניים וגליה משלפוחית השתן של חולדה

קחו חולדה שהורדמה.

פתחו את הבטן, כרתו את שלפוחית השתן וטבלו אותה במאגר.

חותכים את שלפוחית השתן ומסירים שומן דבק ופסולת רקמות.

העבירו את שלפוחית השתן לצינור המכיל חיץ, צנטריפוגה והוציאו את הפסולת.

מניחים את הרקמה בתמיסה המכילה קולגנאז וטוחנים אותה. הוסף עוד קולגנאז כדי לפרק את המטריצה החוץ-תאית, ולשחרר את התאים.

צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט. הוסף טריפסין כדי לשבש את הצמתים בין תא לתא, ולשחרר את התאים.

הוסיפו חומר שטיפה המכיל חלבונים כדי לנטרל את הטריפסין, ולאחר מכן את הצנטריפוגה, והסירו את הסופרנטנט.

השעו מחדש את התאים במדיה; סננו אותם כדי להסיר אגרגטים וקבלו תרחיף של תא בודד.

צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט. השעו מחדש את התאים במדיה.

צלח את התאים על כיסויים מצופים כדי להקל על חיבור תאי עצב וגליה. הסר את התאים שאינם מחוברים.

הוסף מדיה נוירונית המכילה גורמי גדילה כדי לקדם התבגרות תאית, תוך יצירת תרבית עצבית וגליה ראשונית.

התחל בהנחת חולדות על מגבת כירורגית מעוקרת וחשיפת הבטן. השתמש במספריים ובמלקחיים כדי לפתוח את חלל הבטן ולחשוף את שלפוחית השתן. השתמש בסט נוסף של מספריים ומלקחיים כדי להרים בעדינות את שלפוחית השתן ולחתוך אותה מצוואר שלפוחית השתן.

לאחר מכן, הנח במהירות את שלפוחית השתן בתמיסת קרבס קרה ויציבה בחמצן כדי לשפר את הישרדות התאים. הוסיפו את תמיסת קרבס לשלוש צלחות זכוכית ושלוש כו