אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:06 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם תאי עצב שגודלו במדיום התמיינות תאים.
הוסף ננו-מוטות זהב למדיום.
דגירה כדי לאפשר לתא לבלוע את הננו-רוד בתהליך הנקרא אנדוציטוזיס.
לעורר את הננו-מוטות בלייזר.
קרן הלייזר מעוררת את אלקטרוני פני השטח על הננו-מוט. לאחר מכן האלקטרונים הנרגשים חוזרים למצב הקרקע, ומשחררים אנרגיית חום.
חום זה מגרה את תאי העצב לייצר הקרנות הנתמכות על ידי חלבון שלד ציטו ספציפי הנקרא βIII-טובולין.
הסר את המדיום המושקע.
תקן את התאים. הוסף חומר ניקוי מתאים כדי לחדור את הממברנה.
הוסף חומר חוסם כדי למנוע קשירה לא ספציפית של נוגדנים.
סמן את התאים בנוגדנים ראשוניים המכוונים ל-βIII-tubulin.
הוסף נוגדנים משניים מתויגים פלואורסצנטיים המקיימים אינטראקציה עם הנוגדנים הראשוניים.
צבעו את הגרעין בצבע פלואורסצנטי כחול.
באמצעות מיקרוסקופ אפיפלואורסצנטי, התבונן בתאים בצבע אדום עם גרעינים כחולים.
הקרנות מוארכות של התא מצביעות על התמיינות תאי עצב.
גדל את תאי העצב NG108-15 ב-10 מיליליטר של מדיום תרבית תאים בבקבוק T75, ולאחר מכן דגר אותו בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באטמוספירה לחה. כאשר התאים מתכנסים 70% עד 80%, החלף את המדיום במדיום חם ורענן.
לאחר מכן, נתק את התאים באופן מכני על ידי דפיקות עדינות בתחתית הבקבוק המשולב. צנטריפוגה תרחיף תאים למשך חמש דקות ב-600 גרם והשעיה מחדש של כדור התא ב-2 מיליליטר של מדיום התמיינות תאים ח
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים