בידוד וטיפוח של תאי גזע עצביים בוגרים מהאזור התת-קלוסלי של העכבר

נתחיל עם מוח של עכבר על מטריצת מוח צוננת.

השג קטעים המכילים את האזור התת-קלוסלי או SCZ. העבירו את החלק למאגר פוספט קר.

תחת מיקרוסקופ מנתח, גזרו את חלק ה- SCZ.

קוצצים את ה- SCZ המנותח לחתיכות קטנות יותר.

העבירו את החלקים הללו למאגר עיכול. דגירה כדי לנתק את התאים מהרקמה.

צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט. השעו מחדש את התאים במדיום מתאים.

העבירו את התאים לצלחת תרבית והוסיפו גורמי גדילה ספציפיים.

תאי הגזע העצביים הבוגרים מתחלקים ויוצרים אשכולות הנקראים נוירוספרות.

חלוקה לא נכונה של חומרים מזינים באשכולות תאים מגבילה את צמיחת התאים.

כדי לפזר את האשכולות, צנטריפוגות והשליכו את הסופרנטנט. השעו מחדש את האשכולות במאגר דיסוציאציה ודגרו.

פיפטה את התמיסה למעלה ולמטה כדי ליצור תאים בודדים.

צנטריפוגה והשליכו את הסופרנטנט.

השעו מחדש את התאים והעבירו אותם למדיום מתאים לקבלת חד-שכבה.

לאחר הניתוח, העבירו את מוח העכבר למאגר PBS קר, ושטפו אותו פעמיים כדי להסיר עודפי דם. לאחר מכן, הניחו את המוח במטריצת המוח על קרח, ובצעו חתכים עטרתיים כדי לקבל פרוסות בעובי של מילימטר אחד. לאחר מכן, העבירו את פרוסות המוח האחוריות המכילות אזורי SCZ ל-PBS קר.

תחת מיקרוסקופ מנתח עם הגדלה נמוכה, ניתחו את ה-SCZ מאזור החומר הלבן של קליפת המוח וההיפוקמפוס בעזרת מחט כפופה בקוטר 30. לאחר מכן, הסירו את אזורי קליפת המוח מעל ה-SCZ, וה