הקמת תרבית משותפת של נוירונים בין-עצביים עם תאי אנדותל פריוונטריקולריים

קח צלחת תרבית מצופה במצע תרבית תאים כדי להקל על הידבקות התאים.

המנה מכילה תוספת תרבית של באר אחת ללא בסיס המחובר למרכזה, ויוצרת תא מוגדר. קווי המתאר של תא זה מסומנים על הצלחת כדי לצפות בנדידת תאים.

הכנס תרחיף תאים לתא המכיל תאי אנדותל סביב החדר או PVECs, תאים המצפים את כלי הדם במוח ואינטרנוירונים הנודדים לאורך ה-PVECs במהלך התפתחות המוח.

הוסף מדיום תרבית משותפת למנה כדי לשמור על לחות, ודגירה כדי להקל על התאים הנצמדים למצע.

הסר את התוספת כדי לחסל את המחסום הפיזי; רענן את המדיום ודגר שוב.

ה-PVECs מתרבים, ומרחיבים את רשת תאי האנדותל מעבר לגבול ההכנסה.

ה-PVECs מפרישים גורמים הפועלים כרמזים מנחים, ומכוונים את האינטרנוירונים לנדוד לאורך רשת ה-PVEC.

התרבות המשותפת המציגה נדידת בין-נוירונים מוכנה לניתוח.

כדי לבצע את בדיקת התרבות המשותפת, השעו 30,000 תאי עצב פנימיים GABAergic ו-30,000 תאי אנדותל סביב החדר האנושיים ב-70 מיקרוליטר של מדיום תרבית משותפת. לאחר מכן, זרעו את תמיסת התא הזו בתוך תא הכנסה של באר אחת. לאחר 48 שעות, יש להסיר את התוספת. דגרו על התרבות המשותפת ב-37 מעלות צלזיוס ו-5% פחמן דו חמצני למשך חמישה ימים.