ביסוס גידול במוח במודל תרבית משותפת של פרוסות אורגנוטיפיות
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 2:46 דק׳ • July 8th, 2025
התחל עם פרוסת מוח של עכבר משובץ באגרוז.
הניחו את פרוסת המוח על תוספת ממברנה המכילה מדיום תרבית.
טבלו את הפרוסה כדי להבטיח חשיפה אחידה לחומרים מזינים.
אוספים נפח קטן של המדיום מהתוספת ומעבירים אותו לתחתית הבאר.
הסר את המדיום העודף מהתוספת.
מעבירים את התוספת לצלחת פטרי המכילה את מדיום התרבית.
הסר בזהירות את קצוות האגרוז מהפרוסה כדי להפוך אותה לנגישה לאינטראקציות הבאות.
הנח את התוספת בבאר חדשה המכילה את מדיום התרבית ודגר אותה כדי להקל על התאוששות הפרוסה.
הוסף תאי גידול מוח אנושי לפרוסה ודגר.
תאי הגידול מקיימים אינטראקציה עם תאי המוח והמיקרו-סביבה בתוך הפרוסה, יוזמים כפל ויוצרים מודל תלת מימד של תרבית משותפת.
בעזרת כף מחוררת, הניחו פרוסת מוח לתוך המדיה שעל התוספת, ולחצו בעדינות על הפרוסה כך שהיא תהיה שקועה לחלוטין. חזור על ההליך עבור כל הפרוסות. לאחר מכן, משוך מיליליטר אחד של מדיית תרבית פרוסות מהחלק העליון של התוסף, והוציא אותו לתחתית הבאר.
הסר והשליך את המדיה העודפת עד ששולי האגרוז סביב פרוסת המוח נראים לעין, ועשו זאת עבור הפרוסות הנותרות. לאחר מכן, הרם את התוספת מהשפה בעזרת מלקחיים, והטה כדי להסיר עודפי מדיה.
העבירו במהירות את התוספת לכלי 35 מילימטר המכיל מיליליטר אחד של מצע תרבית פרוסות. הסר את האגרוז סביב הרקמה, הקפד לא למתוח או לפגוע בפרוסה או לתקוע חור בקרום. לאחר מכן, הזיזו את
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים