יצירת תחומי תרבות משותפת תלת-ממדית של אסטרוציטים ונוירונים כדי לגרום להיווצרות סינפסות

קח צלחת מרובת בארות המצופה בחומר פעילי שטח כדי להפחית את מתח הפנים של הבאר.

הוסף את היחס הרצוי של אסטרוציטים ונוירונים במדיום תרבית מתאים.

צנטריפוגה ליישוב התאים ואז לדגור.

מתח הפנים הנמוך מונע מהתאים להיצמד למשטח הבאר, וגורם להצטברותם.

התאים נצמדים זה לזה באמצעות אינטראקציות ממברנה שונות, כולל מולקולות הדבקה, ויוצרים כדור קוקולטורה תלת מימדי.

אוספים את הכדורים ומעבירים אותם לצינור.

אפשר לכדורים להתייצב. הסר את הסופרנטנט והוסף מדיום תרבית טרי.

מעבירים את הכדורים לבקבוק ספינר המכיל מצע גידול מתאים ודוגרים בסיבוב מתמיד.

בכדור, הנוירונים מרחיבים הקרנות זה כלפי זה, ויוצרים צומת הנקרא סינפסה, ואילו האסטרוציט משתרע לכיוון הסינפסה, ויוצר קשר הדוק עם הנוירונים.

הוסף את היחס הרצוי של hAstros ו-hNeurons או iNeurons מנותקים בנפח כולל של שני מיליליטר לכל באר של מיקרו-לוחית. צנטריפוגה את הצלחת ב 100 פעמים גרם למשך שלוש דקות, והחזירו לחממה למשך יומיים.

לאחר יום אחד, מיקרוספירות צפופות היו אמורות להיווצר בצלחת. השתמש במיקרופיפטה של 1,000 מיקרוליטר כדי להסיר בעדינות כדורים מהמיקרו-בארות. הפעל קלות כוח על תחתית המיקרו-בארות עם מדיום כדי להסיר כדורים דבוקים נוספים.

לאחר איסוף כל הכדורים בצינור חרוטי של 15 מיליליטר, אפשר לו להתייצב. לאחר מכן, שטפו את הכדורים על ידי שאיבת המדיום הישן, ולאחר מכן הוספת