אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 3:58 דק׳ • July 8th, 2025
התחל בתרבית דבקה של תאי סטרומה של מח עצם.
לחשוף את התאים להיפוקסיה, מצב המאופיין ברמות חמצן מופחתות, למשך זמן נדרש.
בודד את התאים המותנים מראש להיפוקסיה, ואז צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט. השעו מחדש את התאים במצע אב עצבי המכיל גורמי גדילה עצביים.
העבירו את התאים לצלחת תרבית בעלת התקשרות נמוכה ודגרו.
התניה מוקדמת של היפוקסיה וגורמי גדילה עצביים גורמים להתמיינות תאי סטרומה לאבות עצביים.
משטח הלוח בעל ההצמדה הנמוכה שומר על האבות הקדמונים בתרחיף, ומקל על התפשטותם וצבירתם לנוירוספרות תלת מימדיות.
קצור את הנוירוספרות, הצנטריפוגה והסר את הסופרנטנט. השעו מחדש את התאים באמצעי אינדוקציה גליאלי המכיל גורמי גדילה ספציפיים לגליה.
העבירו את הנוירוספרות לצלחת תרבית המצופה בלמינין, רכיב מטריצה חוץ-תאית, ופולי-D-ליזין, פולימר סינתטי טעון חיובית.
המשטח המצופה מקדם הידבקות תאים, ומקל על התקשרות נוירוספרה.
גורמי הגדילה הספציפיים לגליה מעוררים התמיינות אב עצבי לתאים דמויי תאי שוואן המציגים את המורפולוגיה המחודדת האופיינית לתאי שוואן.
למיזוג מוקדם היפוקסי, ראשית, שחרר את מהדק הטבעת ונקה את החלקים החשופים עם 70% אתנול. יתר על כן, פרק את תא ההיפוקסיה לרכיבים והנח אותם במכסה זרימה למינרי לעיקור באור UV למשך 15 דקות.
לאחר מכן, שטפו תרבית MSC משולבת של 80% עד 90% עם 10 מיליליטר PBS כפי שהודגם זה עתה, וטפלו בתר
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים