בידוד של נוירוני DRG והתרבות משותפת עם מבשרי תאי Schwann ליצירת תאי Schwann
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 4:25 דק׳ • July 8th, 2025
קחו לדוגמה את חוט השדרה של עובר חולדה עם גנגליוני שורש גב מחוברים, או DRGs, המכילים נוירונים ותאי גליה.
נתק DRG בודדים מהכבל, העבר אותם לצינור ולצנטריפוגה, והשליך כל פסולת רקמות.
הוסף אנזימים כדי להפריד נוירונים של DRG ותאי גליה.
סובב את התאים והסר כל פסולת. הוסף מדיום תחזוקה עצבי וטריטוראט כדי ליצור מתלה חד-תאי.
העבירו את המתלה למיקרופלייט המצופה במצע תרבית, המקדם את היצמדות התאים.
הכניסו מדיום טיהור ודגרו. החומרים המעכבים של המדיום מבטלים תאי גליה מתחלקים בעוד נוירונים שאינם מתחלקים שורדים.
קחו תאים דמויי תא שוואן, או SCLCs, במדיום של תרבית משותפת. SCLCs, המבשר של תאי שוואן, מקיימים אינטראקציה עם נוירונים עצביים היקפיים עובריים.
הכניסו את ההשעיה לתאי העצב של DRG ודגרו. אינטראקציה של SCLCs עם נוירונים DRG מקדמת את התבגרותם לתאי שוואן.
תאי שוואן שנוצרו מוכנים לניתוח.
כדי לקצור את גרעיני השורש הגביים, העבירו את העובר הראשון לצלחת תרבית של 10 סנטימטרים המכילה PBS בטמפרטורת החדר תחת מיקרוסקופ מנתח במצב נוטה והכניסו מלקחיים מיקרו-מנתחים משני צידי חוט השדרה.
באמצעות דיסקציה קהה, הפרד את חוט השדרה מהרקמה הרכה שמסביב, באמצעות מלקחיים כדי לכרות את חוט השדרה לאורך פתח הצוואר ובדל הזנב. הסר את שאריות הרקמה הרכה מחוט השדרה המשוחרר עד שיישארו רק חוט השדרה, שורשי העצבים וגנגליון השורש הגבי המחו
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים