ציפוי מחדש של תאי עצב ממוינים שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים

0 צפיות4:20 דק' • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

התחל עם לוחית תרבית גדולה המכילה נוירונים מובחנים שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים עם רשת עצבית צפופה.

דגרו את הנוירונים הללו עם אנזימים פרוטאוליטיים עדינים כדי לנתק אותם מהצלחת, והרימו אותם כסדין.

עם הדגירה המתמשכת, אנזימים משבשים חלקית את חיבורי התאים, ומשחררים את הרשתות העצביות.

הוסף מדיום תרבית כדי לעצור את פעילות האנזים.

הפעילו שוב ושוב את הנוירונים המנותקים כדי להפריד אותם זה מזה.

סננו את הנוירונים דרך מסננת תאים כדי להסיר גושי תאים ולאסוף את הנוירונים הבודדים.

צנטריפוגה והסר את הסופרנטנט. השעו אותם במדיום גידול.

לצורך ציפוי מחדש, זרעו את הנוירונים הללו על פולימר וצלחת מרובת בארות מצופה חלבון הדבקה. דגירה כדי לאפשר את התקשרותם.

נוירונים מנצלים חומרים מזינים מהמדיום כדי להישאר ברי קיימא. החלף את מדיום התרבית באופן קבוע כדי לשמור על רמות החומרים המזינים.

דגירה נוספת כדי לאפשר התבגרות עצבית ויצירת קשרים ביניהם.

התחל בשטיפה עדינה של צלחת הנוירונים המובחנים עם PBS. פזרו את ה-PBS לאורך דופן הצלחת, ולא ישירות על התאים כדי למנוע שיבוש שלהם. שאפו את ה- PBS מקצה המנה תוך כדי הטיה, תוך הקפדה לא לגעת בתאים.

מרחו לפחות 1 מיליליטר של אנזים פרוטאוליטי לכל צלחת של 10 סנטימטרים, והחזירו את התאים לחממה למשך 40 עד 45 דקות. במהלך הדגירה, בדקו נוירונים במיקרוסקופ ניגוד פאזה, והמשיכו בטיפול בפרוטאז עד שהרשת העצבית מתנתקת לחלוטין מהצלחת ומתחילה להתפרק. כאשר הנוירונים מתנתקים, עצור את העיכול על ידי הוספת 5 מיליליטר של מדיה DMEM טרייה לכל מיליליטר פרוטאז.

השתמש בפיפטה סרולוגית כדי לשלש בעדינות את התאים כנגד הצלחת 5 עד 8 פעמים, והקפד לא להפעיל לחץ רב מדי. מסננים את התאים דרך רשת של 100 מיקרומטר לתוך צינור חרוטי של 50 מיליליטר טיפה אחר טיפה, ושוטפים את המסננת עם 5 מיליליטר נוספים של מדיה DMEM טרייה.

השתמש בצנטריפוגה ספסל כדי לסובב את התאים כלפי מטה ב -1,000 פעמים גרם למשך 5 דקות. לאחר הצנטריפוגה, החזירו את הצינור החרוטי לארון הבטיחות הביולוגית ושאבו את רוב המדיה, והשאירו 250 מיקרוליטר כדי לשמור על לחות התאים. השעו בעדינות את התאים ב-2 מיליליטר של מדיה DMEM טרייה, והעבירו אותם דרך קצה פיפטה סרולוגית של 5 מיליליטר.

לבסוף, הפוך את הצינור פעמיים עד שלוש. השתמש בהמוציטומטר ובטריפן כחול כדי לספור את התאים הקיימאים, ולאחר מכן לדלל את התאים ב-DMEM טרי לריכוז הרצוי. הוסף תוספים מתאימים לצינור בהתאם לדרישות קו התאים הספציפי, וערבב בעדינות את התאים על ידי הטיית הצינור החרוטי 2 עד 3 פעמים.

שואבים ציפוי למינין מצלחת של 24 בארות ושוטפים אותו פעם אחת עם PBS. שאפו את ה-PBS ומרחו תמיסת תאים על כל באר בתנועה של הספרה שמונה כדי למנוע גושים. בסיום ציפוי התאים, החזירו את הצלחת לחממה שנקבעה על 37 מעלות צלזיוס ו -5% פחמן דו חמצני.

09:31

זהב nanorod בסיוע גירוי אופטי של תאים עצביים

סרטונים קשורים

0 צפיות

08:01

התמיינות עצבית מתאי גזע עובריים של העכבר במבחנה

סרטונים קשורים

0 צפיות

11:42

אין ויטרו מידול למחלות נוירולוגיות באמצעות המרה ישירה מפיברובלסטים לתאי אב עצביים ובידול לאסטרוציטים

סרטונים קשורים

0 צפיות

10:47

גזירת יעיל של אבות עצב נוירונים האדם מן האדם תאים pluripotent גזע עובריים עם אינדוקציה מולקולה קטנה

סרטונים קשורים

0 צפיות

07:27

דור מהיר ויעיל של נוירונים מתאי גזע pluripotent אדם בפורמט פלייט Multititre

סרטונים קשורים

0 צפיות

04:33

התמיינות תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם לתאי עצב במערכי מיקרו-אלקטרודות

סרטונים קשורים

0 צפיות

02:16

התמיינות תאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים שאינם מהונדסים לתאי אב עצביים

סרטונים קשורים

0 צפיות

03:21

התמיינות תאי גזע פלוריפוטנטית אנושית בתאי עצב באמצעות לנטי-וירוסים מהונדסים

סרטונים קשורים

0 צפיות

06:40

בימוי דופאמין Neuron בידול מתאי גזע pluripotent האדם

סרטונים קשורים

0 צפיות

09:20

בידול העצבי המהיר של גזע תאים המושרה pluripotent למדידת פעילות רשת על מערכי מייקרו-אלקטרודה

סרטונים קשורים

0 צפיות

עודכן לאחרונה: 1 אוגוסט 2026