JoVE Encyclopedia of Experiments
מדעי המוח
0 צפיות • 2:20 דק' • July 8th, 2025
התחל עם תאי גזע עצביים שגודלו על כיסוי מצופה מטריצה חוץ-תאית במדיום התמיינות מתאים.
קח מזרק המכיל פלזמה קרה, שהיא מצב של חומר המכיל רכיבים תגובתיים שונים, כולל קרינת UV וחלקיקים טעונים.
מקם את הזרבובית של מזרק הפלזמה בגובה מסוים מעל תרבית תאי העצב.
הפעל את סילון הפלזמה.
הפלזמה מקיימת אינטראקציה עם תאי הגזע העצביים ומפעילה אותם.
הסר את מדיום התרבות הישן. הוסף מדיום תרבית טרי ודגירה.
עם הזמן, תאי הגזע העצביים המופעלים מייצרים הקרנות.
זרוק את המדיום.
תחת מיקרוסקופ אור ניגודיות פאזה הפוכה, נוכחות של הקרנות מוארכות על התאים, הדומות לאלו שנמצאות בתא עצב, מעידה על התמיינות.
כדי לטפל בפלזמה בתאי הגזע העצביים, הגדר את המרחק בין פיית המזרק לבאר התאים הראשונה ל-15 מילימטרים. החלף את הסופרנטנטים בתרביות תאי הגזע העצביים ב-800 מיקרוליטר של מדיום התמיינות טרי, והנח את הצלחת מתחת לסילוני הפלזמה.
יש לוודא כי פיית המזרק מקובעת מעל מרכז כל באר, ליצור שלוש בארות עם פלזמה למשך 60 שניות לכל טיפול, ושלוש בארות עם 1% הליום וגז חמצן למשך 60 שניות לכל טיפול, ולהשאיר שלוש בארות ללא טיפול כבקרה. לאחר מכן, החליפו את הסופרנטנטים במיליליטר אחד של מדיום התמיינות טרי, והחזירו את התאים לחממה למשך שישה ימים. בדוק את מצב הבידול של הקבוצות השונות מדי יום תחת מיקרוסקופ אור ניגודיות פאזה הפוך.
לאחר הטיפול, אפשר לתאים להתייצב באופן מלא בתווך המותנה למשך כשעה לפני החלפת הסופרנטנט במדיום התמיינות טרי.