התמיינות של תאי אב עצביים לתאי עצב

התחל עם צלחת מרובת בארות מצופה ג'לטין המכילה תאי אב עצביים שמקורם בתאי גזע עובריים של עכבר במדיום התמיינות בסיסי עשיר בחומרים מזינים.

תאי האב מנצלים את החומרים המזינים הללו מהתקשורת כדי לשמור על חיותם.

דגירה כדי לאפשר חיבור תאים למשטח המצופה ג'לטין, ולאחר מכן שטפו כדי להסיר תאים ופסולת לא מחוברים.

הציגו מדיום התמיינות בסיסי בתוספת חומר מייצב, חומרים מזינים נוספים וגורמי גדילה עצביים החיוניים להתמיינות תאים ולאחר מכן דגירה.

תאי האב צורכים את החומרים המזינים וגורמי הגדילה, ומתחילים את התמיינותם לנוירונים שמתחילים להרחיב את התהליכים התאיים שלהם.

במקביל, הגורם המייצב מקיים אינטראקציה עם מטבוליטים רעילים ומגן על הנוירונים המתפתחים מפני נזק חמצוני, ושומר על כדאיותם.

יש להחליף את המדיה באופן קבוע כדי לשמור על רמות החומרים המזינים.

עם הזמן, הנוירונים מתבגרים, ומפתחים אקסונים - התהליכים התאיים הארוכים יותר.

בנוסף, הם גם מפתחים דנדריטים, התהליכים התאיים הקצרים יותר, המאשרים התמיינות של תאי גזע לנוירונים.

זרעו כ-500,000 נגזרות של תאי גזע עובריים של עכברים ב-2 מיליליטר של מדיום התמיינות בסיסי לבאר על צלחות מצופות ג'לטין של 0.1%. חלקו באופן אקראי את הנגזרות לשלוש קבוצות על מנת לבדוק שלושה פרוטוקולי התמיינות שלב II. דגרו על הצלחת למשך שש שעות. לאחר מכן, שטפו את התאים פעמיים עם 2 מיליליטר PBS והוסיפו 2 מיליליטר של מדיום התמיינות בסיסי, N2 B27 בינוני 1, או N2 B27 בינוני 2 לכל באר, בהתאם לפרוטוקול. הכניסו את הצלחות לאינקובטור, ואפשרו לתאים להתמיין במשך 10 ימים נוספים, והחליפו את המדיום המתאים כל יומיים.