בידוד תאים מגרעינים חושיים

קח גנגליונים חושיים שטופים מראש בצינור.

הוסף תמיסת דיסוציאציה המכילה תערובת של אנזימי עיכול ודגירה.

אנזימים אלה מפרקים את המטריצה החוץ-תאית, ומשחררים תאים בודדים.

לאחר הדגירה, הסר את תמיסת הדיסוציאציה.

שוטפים את הגרעינים עם מאגר פוספט, ומוסיפים תמיסת דיסוציאציה טרייה.

פיפטה את הגרעינים למעלה ולמטה כדי לנתק את התאים.

העבירו את המתלה דרך מסננת תאים כדי להסיר גושים.

אסוף את כל התאים שנותרו מתחתית המסננת והכניס אותם לצינור.

שכב את מתלה התא על צינור שיפוע צפיפות וצנטריפוגה.

בהתבסס על ההבדלים בצורה ובמסה, תאים נודדים לשכבה התחתונה, בעוד שפסולת תאית נשארת בשכבה העליונה.

השליכו את השכבה העליונה.

הוסף מדיום טרי לתרחיף התאים ולצנטריפוגה שנותרו.

השליכו את הסופרנטנט ואחסנו את תאי הגרעינים החושיים לשימוש נוסף.

לאחר קצירת הגרעינים החושיים, יש לשאוב 500 מיקרוליטר של תמיסת דיסוציאציה של גנגליונים מכל צינור מבלי להפריע לגרעין. לאחר מכן, הוסף 1 מיליליטר PBS לכל דגימה והמתן עד שהגנגליונים יתייצבו בתחתית הצינורות.

לאחר מכן, הסר את ה-PBS והוסף 1 מיליליטר של תמיסת דיסוציאציה של גנגליונים בתוספת אנזים עיכול לנוירונים. דגרו את הצינורות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך הזמן המתאים, בהתבסס על גיל אנזים העיכול, ניעור ותנועה קצרה של הצינורות כל 15 דקות כדי להבטיח שהגנגליונים מכוסים בתמיסת העיכול.

בזמן שתאי ה